| 无标签鼠疫耶尔森菌V抗原突变体在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 王猛,任军,张金龙,李浩,蔡晨光,李建民,陈薇.无标签鼠疫耶尔森菌V抗原突变体在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性分析[J].生物技术通讯,2012,23(1). |
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| 作者姓名： | 王猛 任军 张金龙 李浩 蔡晨光 李建民 陈薇 |
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| 摘 要： | 目的：在大肠杆菌中表达、纯化无标签鼠疫耶尔森菌低钙反应Ｖ抗原突变体，并对其免疫原性进行研究。方法：采用融合ＰＣＲ方法将Ｖ抗原基因中编码半胱氨酸的碱基缺失突变，将获得得Ｖ抗原突变体基因克隆到原核表达载体ｐＥＴ３２ａ（＋）后转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３），用ＩＰＴＧ诱导表达并进行柱层析纯化，纯化产物以Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹进行鉴定并免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，通过ＥＬＩＳＡ检测免疫血清效价。结果：目的蛋白在大肠杆菌中获得了可溶性高表达，经三步柱层析后纯度高于９５％，经Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测可与野生型Ｖ抗原单克隆抗体特异性结合，免疫小鼠后获得高效价免疫血清。结论：获得了无标签的鼠疫耶尔森菌Ｖ抗原突变体蛋白，并证实其具有免疫原性，将对Ｖ抗原结构和功能的研究提供帮助。
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| 关 键 词： | 鼠疫耶尔森菌 Ｖ抗原突变体 表达纯化 免疫原性 |
Expression and Purification of Non-Tagged Yersinia pestis LcrV Antigen Mutant in Escherichia coli and its Immunogenicity in BALB/c Mice |
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| WANG Meng
,
REN Jun
,
ZHANG Jin-Long
,
LI Hao
,
CAI Chen-Guang
,
LI Jian-Min
,
CHEN Wei.Expression and Purification of Non-Tagged Yersinia pestis LcrV Antigen Mutant in Escherichia coli and its Immunogenicity in BALB/c Mice[J].Letters in Biotechnology,2012,23(1). |
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| Authors: | WANG Meng REN Jun ZHANG Jin-Long LI Hao CAI Chen-Guang LI Jian-Min CHEN Wei |
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