| 含吸氢酶基因（hup）嵌合质粒的构建和吸氢酶活性在阴沟肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 吴永强,朱美珍,梁建光,华征,宋鸿遇.含吸氢酶基因（hup）嵌合质粒的构建和吸氢酶活性在阴沟肠杆菌中的表达[J].植物生理与分子生物学学报,1996(3). |
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| 作者姓名： | 吴永强 朱美珍 梁建光 华征 宋鸿遇 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海植物生理研究所 |
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| 摘 要： | 以质粒ｐＲＫ４０４为载体亚克隆含大豆根瘤菌吸氢酶结构基因（ｈｕｐ）的片段，构建成嵌合质粒ｐＨＲ１１、ｐＨＲ４和ｐＨＲ１０。通过三亲本杂交将这些嵌合质粒导入无吸氢活性的Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ２４１菌株（Ｈｕｐ－），均获得Ｈｕｐ＋的接合子。利用启动子检测质粒ｐＭＰ２２０证明，在ｈｕｐ对结构基因上游１．２ｋｂ内存在ｈｕｐ启动基因片段。以ｐＲＫ２０１３为助质粒可将ｐＨＲ１１导入Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｃｌｏａｃａｅ和Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａｏｘｙｔｏｃａ等土壤固氮菌株。本文以接合子Ｅ．ｃｌｏａｃａｅＥＨ１１１３为例，通过对基因组ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析证明，嵌合质粒ｐＨＲ１１在ＥＨ１１１３中稳定贮存和复制。Ｈ２诱导接合子ＥＨ１１１３吸氢酶活性高表达，吸氢活性与放氢活性比值约为对照的两倍。当以延胡索酸为电子受体时，吸氢酶的吸氢作用支持菌株固氮酶活性的提高。
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| 关 键 词： | 吸氢酶基因，固氮细菌，接合转移，吸氢酶，阴沟肠杆菌 |
The Construction of Chimeric Plasmid Carrying hup Genes from Bradyrhizobium japonicum and Expression of H_2-uptake Hydrogenase Activity in Enterobacter cloacae |
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| WU Yong-Qiang, ZHU Mei-Zheng, LIANG Jian-Guang, HUA Zheng and SONGHong-Yu.The Construction of Chimeric Plasmid Carrying hup Genes from Bradyrhizobium japonicum and Expression of H_2-uptake Hydrogenase Activity in Enterobacter cloacae[J].Journal Of Plant Physiology and Molecular Biology,1996(3). |
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| Authors: | WU Yong-Qiang ZHU Mei-Zheng LIANG Jian-Guang HUA Zheng and SONGHong-Yu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | hup gene soil nitrogen-fixing bacteria conjugal transfer H_2-uptake hydrogenase Enterobactercloacae |
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