沉默MDR1基因逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性

本研究利用短发夹sh RNA(short hairpin RNA)沉默SGC7901/ADM细胞MDR1基因,从而逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性。根据MDR1基因序列设计并合成编码sh RNA的DNA模板,构建3种靶向MDR1基因重组干扰载体,稳定转染SGC7901/ADM细胞,q RT-PCR检测MDR1 m RNA表达水平,Western blotting检测MDR1蛋白表达水平,MTT法检测细胞对紫杉醇的敏感性。结果表明,成功构建了靶向MDR1基因的3种重组表达载体,分别转染SGC7901/ADM细胞后均能不同程度沉默MDR1基因的表达,其中p2.1-3对MDR1沉默效果最好,m RNA和蛋白的沉默效率分别为78.5%和45%。紫杉醇对细胞的IC50值由(3.147±0.494)μmol/L降至(0.714±0.059)μmol/L,逆转率达到(78.22±1.906)%。结果表明,靶向MDR1的干扰表达载体能够抑制MDR1基因的表达,从而逆转SGC7901/ADM细胞对紫杉醇的耐药性。