粟酒裂殖酵母线粒体及线粒体RNA的提取

粟酒裂殖酵母是一个研究线粒体生物合成的优秀的真核生物模型。本研究利用差速和蔗糖梯度离心法获得了粟酒裂殖酵母线粒体。用BCA法检测了线粒体蛋白浓度,用Western-blot和电子显微镜检测了线粒体纯度以及完整度。以纯化获得的线粒体进行RNAs提取,得到包括t RNA和小RNA在内的线粒体RNA,并用电泳和定量PCR检测了线粒体RNAs的纯度和完整度。结果表明,我们得到了高质量的粟酒裂殖酵母线粒体和线粒体RNAs。线粒体和线粒体RNA制备方法为研究蛋白靶标、蛋白定位和线粒体RNA加工提供了技术工具。