重组布氏乳杆菌漆酶表达的研究

本研究将杏鲍菇漆酶基因接入食品级宿主细胞乳酸杆菌中,成功构建重组工程乳酸菌。为筛选出单个转化菌株,将重组工程乳酸菌液涂布到含有红霉素的固体MRS培养基中,挑取白色菌落直接进行PCR,筛选阳性重组子。并提取筛选到的阳性重组子质粒,进一步进行PCR验证。将验证过确实存在漆酶基因的阳性重组子涂布到含有愈创木酚的固体培养基中进行培养,菌落颜色变成红棕色表明具有分泌漆酶的能力,挑取颜色变化较深的菌落,测定其酶活。成功筛选到具有产漆酶能力的重组工程乳酸菌,对其适宜温度、酸碱度进行了研究。具有分泌漆酶能力的乳酸菌若能作为青贮饲料的添加剂,将大大提高青贮饲料的利用率及品质。