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人热休克蛋白70的原核高效表达
引用本文:高娟,杨守京,付勇,刘彦仿. 人热休克蛋白70的原核高效表达[J]. 生物技术通讯, 2004, 15(4): 338-341
作者姓名:高娟  杨守京  付勇  刘彦仿
作者单位:第四军医大学,病理学教研室,西安,710032
基金项目:国家自然科学基金(30271186)
摘    要:将人热休克蛋白基因hsp70片段克隆到高效原核表达载体pMAL-c2X中,酶切鉴定并进行DNA测序。将该重组表达载体转化大肠杆菌DH50α,用IPTG在不同温度及时间下进行诱导表达。收集细菌,菌体裂解后进行SDS-PAGE及Western blot检测,并以凝胶薄层扫描分析表达水平。结果表明,成功地构建了含人hsp70基因的表达载体pMAL-c2X/hsp70,该载体能在大肠杆菌中表达相对分子质量为110000并具有抗原活性的融合蛋白;改变诱导温度和时间,目的蛋白表达总量及可溶性部分所占比例不同。对人hsp70基因的克隆、表达,并对其进行表达条件的优化,为研究HSP70的结构、功能与临床应用提供了必要条件。

关 键 词:人热休克蛋白 基因 hsp70 克隆 原核表达 载体
文章编号:1009-0002(2004)04-0338-04
修稿时间:2003-12-08

Prokaryotic high level expression of human heat shock protein 70 gene
GAO Juan,YANG Shou-jing,FU Yong,LIU Yan-fang. Prokaryotic high level expression of human heat shock protein 70 gene[J]. Letters in Biotechnology, 2004, 15(4): 338-341
Authors:GAO Juan  YANG Shou-jing  FU Yong  LIU Yan-fang
Affiliation:GAO Juan,YANG Shou-jing,FU Yong,LIU Yan-fang Department of Pathology,Fourth Military Medical University,Xi 'an710032,China
Abstract:
Keywords:heat shock protein70  gene clone  prokaryotic expression
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