两种试剂盒提取大鼠容受期少量宫腔液胞外囊泡的比较

容受期宫腔液对于胚胎建立早期妊娠起着关键作用,宫腔液内含的胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)可能是子宫内膜与胚胎之间交流的新模式。目前为止,仍然没有一种提取方法能同时保证EVs的含量、纯度和生物活性。传统的超速梯度离心法对设备和样本量要求高,耗时长,因此寻求在少量样本中高效提取高纯度EVs的新方法十分重要。本研究对同一份大鼠容受期宫腔液样本分别采取PEG沉淀和亲和膜离心柱两款试剂盒进行EVs提取,使用透射电镜、Western-blot和动态光散射进行形态、表面蛋白质和粒径分布的鉴定,并对其内容物RNA进行了浓度和片段分布比较。结果显示,两种试剂盒都可以成功从少量的宫腔液样本中分离得到EVs,且效率较传统离心法大大提高,但均无法完全区分其亚群;亲和膜离心柱提取法得到的EVs浓度更高,RNA片段集中在20~40 nt,对于开展后续mi RNA建库测序分析具有更好效果。