Gel filtration of bacterial cell extract

Так как от остатков гомогенизированных клеток легко отделить растительные вирусы (Steere и Qckers, 1962; ?ech, 1962) и митохондрии (Hjertén, 1962), мы сделали попытку использовать этот простой метод и для отделения рибосом. Надосадок гомогената растущих клеток Bacillus megaterium 110 наносили на столбец 3% гранулированного агара (Polson, 1961) и промывали 66 мл буферного раствора Tris (pH 7,72, 0,005 M с 0,01 M?MgCl₂) в течение часа при комнатной температуре. В элюате определяли абсорбцию при 260 мμ и белки (рис. 1). При ультрацентрифугировании образца были обнаружены рибосомы с S ₂₀ ⁰ 107, 71, 5, 45 и 30S (рис. 2). Ультрацентрифугированием фракции № 10 были с помощью адсорбции в УФ лучах найдены рибосомы с s ₂₀ ⁰ 107 и 44,6S (рис. 3). Группа 100S перекрывалась абсорбцией рибосом 70S, группа 30 не была обнаружена. Отделение рибосом как самостоятельной вершины не было получено. Однако, судя по соотношению нуклеиновых кислот и белков во главе вымываемой плазмы (где присутствует только РНК), здесь имела место концентрация практически чистых рибосом, как подтверждает и седиментация. ДНК удавалось определить только во фракциях второй половины элюата плазмы (рис. 4).