HBV—C基因探针的制备及应用

应用ＰＣＲ技术扩增出ＨＢＶ ＤＮＡ Ｃ基因片段并与ｐＡＴ１５３质粒重组，转化到Ｅ．ｃｏｌｉ ＲＲＩ中，经体内扩增，提纯，用光生物系标记，制备了Ｃ基因的重组质粒探针。该探检测灵敏度在Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹中达１ｐｇ，在点印迹中为５ｐｇ。用此探针以Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹方式配合ＰＣＲ技术检测乙肝病人血清中的ＨＢＶ ＤＮＡ，在５３例ＰＣＲ产物电泳检测阴性的样品中，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交又检出１８例阳性。