| 不同信号肽对人鼠嵌合CMV-IgM分泌表达的影响 |
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| 引用本文： | 崔亚敏,田晓平,赵巧辉,李桂林.不同信号肽对人鼠嵌合CMV-IgM分泌表达的影响[J].生物工程学报,2020,36(6):1223-1231. |
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| 作者姓名： | 崔亚敏 田晓平 赵巧辉 李桂林 |
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| 作者单位： | 郑州伊美诺生物技术有限公司，河南 郑州 450016 |
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| 摘 要： | 为了实现在体外制备巨细胞病毒-免疫球蛋白M(CMV-IgM)和探讨不同信号肽对CMV-IgM表达的影响,通过RLM-RACE技术钓取杂交瘤细胞基因序列,构建人鼠嵌合CMV-IgM表达载体,并通过PCR方法将5种不同的分泌型信号肽(SigA–SigE)代替CMV-IgM自身信号肽(SigF),利用中国仓鼠卵巢细胞(CHO)作为宿主细胞进行体外表达。对纯化后的CMV-IgM进行SDS-PAGE、SEC-HPLC和酶联免疫吸附试验(ELISA)确定其蛋白表达水平与免疫反应性,最终成功制备出910 kDa的重组蛋白,且研究表明,5种信号肽(SigA–SigE)的人鼠嵌合CMV-IgM表达量较CMV 6#细胞株自身信号肽SigF相比,分别提高了6.72、5.19、1.44、1.85、1.98倍。这将对人鼠嵌合CMV-IgM的开发提供理论基础,且为提高CMV-IgM表达量的研究工作提供了新思路。
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| 关 键 词： | 巨细胞病毒-免疫球蛋白M，人鼠嵌合，信号肽，表达 |
| 收稿时间： | 2019/9/19 0:00:00 |
Effects of different signal peptides on the secretion of human-mouse chimeric CMV-IgM |
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| Yamin Cui,Xiaoping Tian,Qiaohui Zhao,Guilin Li.Effects of different signal peptides on the secretion of human-mouse chimeric CMV-IgM[J].Chinese Journal of Biotechnology,2020,36(6):1223-1231. |
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| Authors: | Yamin Cui Xiaoping Tian Qiaohui Zhao Guilin Li |
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| Institution: | Zhengzhou Immuno Bio-Tech Co., Ltd, Zhengzhou 450016, Henan, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CMV-IgM human-mouse chimeric signal peptide expression |
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