| 鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫细胞/杆状病毒系统中的表达 |
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| 引用本文： | 韩宗玺,刘胜旺,孔宪刚,冉多良.鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫细胞/杆状病毒系统中的表达[J].中国生物工程杂志,2004,24(4):59-62. |
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| 作者姓名： | 韩宗玺 刘胜旺 孔宪刚 冉多良 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室, 哈尔滨150001;
2. 新疆农业大学动物医学院, 乌鲁木齐 830052 |
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| 基金项目： | 国家 8 63计划资助项目 ( 2 0 0 1AA2 490 3 2 ) |
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| 摘 要： | 将编码鸡的白细胞介素 1 8(chickeninterleukine 1 8,ChIL 1 8)成熟蛋白的基因亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacB上 ,构建真核转移载体pMelBacBChIL 1 8,经限制性内切酶消化、ChIL 1 8特异引物PCR鉴定和确证性序列测定 ,证明目的基因正确克隆到载体的预期位点。将纯化的pMelBacBChIL 1 8质粒与杆状病毒DNA(Bac N BlueTM DNA)共转染sf9昆虫细胞 ,经四轮蓝斑筛选纯化 ,获得了重组杆状病毒 ,命名为rBaculovirusChIL 1 8。提取病毒染色体DNA ,经ChIL 1 8特异引物和重组杆状病毒特异引物PCR鉴定 ,证明获得了纯化的重组杆状病毒。用该重组病毒接种sf9昆虫细胞 ,收获接种后不同时间的细胞进行SDS PAGE电泳。结果表明ChIL 1 8基因在昆虫细胞中获得了表达 ,表达的重组蛋白分子量约为 2 3kDa。应用在大肠杆菌原核表达系统中表达的重组蛋白制备的兔抗ChIL 1 8多克隆抗体进行Westernblot分析 ,表明本研究真核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白和前期原核系统表达的ChIL 1 8成熟蛋白均具有生物学活性。
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| 关 键 词： | ChIL-18 成熟蛋白 昆虫细胞杆状病毒系统 表达 |
| 收稿时间： | 2004-01-12 |
| 修稿时间： | 2004年1月12日 |
Biologically Active Chicken Interleukine-18 Expression in Insect Cell/Baculovirus Expression System |
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| HAN Zong-xi , LIU Sheng-wang KONG Xian-gang RAN Duo-liang.Biologically Active Chicken Interleukine-18 Expression in Insect Cell/Baculovirus Expression System[J].China Biotechnology,2004,24(4):59-62. |
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| Authors: | HAN Zong-xi LIU Sheng-wang KONG Xian-gang RAN Duo-liang |
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| Institution: | HAN Zong-xi 1,2 LIU Sheng-wang 1 KONG Xian-gang 1 RAN Duo-liang 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ChIL-18 Mature protein Insect cell/Baculovirus expression system Expression |
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