转译起始密码子周边序列的改变对Δ6-脂肪酸脱氢酶基因表达的影响 |
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作者姓名: | 张琦 李明春 孙颖 马海庭 邢来君 |
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作者单位: | 1. 南开大学微生物学系,天津,300071;云南大学微生物研究所教育部微生物资源开放研究重点实验室,昆明,650091 2. 南开大学微生物学系,天津,300071 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,教育部高校骨干教师资助计划 |
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摘 要: | 将少根根霉中Δ6-脂肪酸脱氢酶基因(RAD6)的起始密码子周边序列作适当的修改,并把修改后获得的片段(RAD6_1)亚克隆到表达载体pYES2.0,构建重组表达载体pYRAD6_1。经测序验证,把pYRAD6_1转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达分析,同时以空载体pYES20和出发序列所构建的pYRAD6作为对照。通过气相色谱(GC)和气相色谱/质谱(GC_MS)分析表明,在pYRAD6和pYRAD6_1转化的酿酒酵母中生成γ_亚麻酸,而pYES2.0中没有检测到。其中,pYRAD6-1转化的酿酒酵母γ_亚麻酸表达量占细胞总脂肪酸含量的5.23%,而对照pYRAD6转化的酿酒酵母中表达量只占2.64%。
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关 键 词: | 少根根霉,Δ6-脂肪酸脱氢酶基因,转译起始密码子,酿酒酵母,γ_亚麻酸,表达 |
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