一种适用于RT-PCR的石榴籽粒总RNA提取方法 |
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引用本文: | 黄有凯,曹丹琴,彭媛媛,龚凌燕,张水明.一种适用于RT-PCR的石榴籽粒总RNA提取方法[J].生物学杂志,2013(4):90-92. |
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作者姓名: | 黄有凯 曹丹琴 彭媛媛 龚凌燕 张水明 |
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作者单位: | 安徽农业大学园艺学院;合肥一中 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30900971) |
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摘 要: | 为从石榴籽粒中提取高质量的RNA,以便进行后续分子生物学研究,针对石榴籽粒富含次生代谢物的特点,采用CTAB法并进行了改良,利用氯仿/异戊醇替代其他方法中的"异硫氰酸胍"和"Trizol试剂"进行反复抽提去除蛋白,无水乙醇去除多糖,LiCl消化DNA。结果显示:改良CTAB法提取的石榴籽粒总RNA的28S rRNA、18SrRNA条带清晰,完整性较好;OD260 nm/OD280 nm比值为1.9960,纯度较高。在此基础上通过反转录、PCR扩增出符合预期大小的Actin基因片段,表明该方法提取的RNA可满足后续RT-PCR等分子生物学试验研究。
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关 键 词: | 石榴籽粒 总RNA 改良CTAB法 RT-PCR |
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