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一种适用于RT-PCR的石榴籽粒总RNA提取方法
引用本文:黄有凯,曹丹琴,彭媛媛,龚凌燕,张水明.一种适用于RT-PCR的石榴籽粒总RNA提取方法[J].生物学杂志,2013(4):90-92.
作者姓名:黄有凯  曹丹琴  彭媛媛  龚凌燕  张水明
作者单位:安徽农业大学园艺学院;合肥一中
基金项目:国家自然科学基金项目(30900971)
摘    要:为从石榴籽粒中提取高质量的RNA,以便进行后续分子生物学研究,针对石榴籽粒富含次生代谢物的特点,采用CTAB法并进行了改良,利用氯仿/异戊醇替代其他方法中的"异硫氰酸胍"和"Trizol试剂"进行反复抽提去除蛋白,无水乙醇去除多糖,LiCl消化DNA。结果显示:改良CTAB法提取的石榴籽粒总RNA的28S rRNA、18SrRNA条带清晰,完整性较好;OD260 nm/OD280 nm比值为1.9960,纯度较高。在此基础上通过反转录、PCR扩增出符合预期大小的Actin基因片段,表明该方法提取的RNA可满足后续RT-PCR等分子生物学试验研究。

关 键 词:石榴籽粒  总RNA  改良CTAB法  RT-PCR
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