| 茶树不同器官组织总RNA提取方法的研究 |
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| 引用本文： | 杨冬青,王云生,孙美莲,单育,骆洋,韦朝领,高丽萍,夏涛. 茶树不同器官组织总RNA提取方法的研究[J]. 激光生物学报, 2011, 20(1): 108-115. DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2011.01.021 |
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| 作者姓名： | 杨冬青 王云生 孙美莲 单育 骆洋 韦朝领 高丽萍 夏涛 |
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| 作者单位： | 1. 安徽农业大学农业部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,安徽,合肥,230036
2. 安徽农业大学生命科学学院,安徽,合肥,230036 |
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| 基金项目： | 国家"973"计划前期项目，国家自然科学基金，安徽省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 从茶树组织中提取高质量的总RNA,是开展茶树基因组学、功能基因组学研究的重要前提,而RNase、多酚类物质严重干扰茶树总RNA的分离提取。鉴于茶树组织总RNA提取过程难易不一、总RNA提取质量良莠不齐的现状,现对材料用量、提取液、DNA和蛋白质抽提液、RNA沉淀试剂、多酚氧化抑制剂等进行了比较研究,建立了一种适合茶树各器官组织总RNA提取的简单高效的方法(简易CTAB-LiCl法),并与实验室常用的改良Tri-Reagent法、改良CTAB法进行了比较。核酸定量和琼脂糖凝胶电泳检测结果显示,简易CTAB-LiCl法从茶树各器官组织中提取到的总RNA质量高、得率高。总RNA的得率是改良CTAB法的1.6-5倍。因此,简易CTAB-LiCl法具有效率高、适用范围广,且操作简单、实验成本低的特点。RT-PCR和cDNA-AFLP实验表明,提取的总RNA能够用于后续的分子生物学研究。
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| 关 键 词： | 茶树 总RNA 器官 提取方法 简易CTAB-LiCl法 |
A Simple and Effective Method for Extracting Total RNA from Different Organs of Tea Plant [Camellia sinensis (L.) O. Kuntze] |
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| YANG Dong-qing,WANG Yun-sheng,SUN Mei-lian,SHAN Yu,LUO Yang,WEI Chao-ling,GAO Li-ping,XIA Tao. A Simple and Effective Method for Extracting Total RNA from Different Organs of Tea Plant [Camellia sinensis (L.) O. Kuntze][J]. ACTA Laser Biology Sinica, 2011, 20(1): 108-115. DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2011.01.021 |
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| Authors: | YANG Dong-qing WANG Yun-sheng SUN Mei-lian SHAN Yu LUO Yang WEI Chao-ling GAO Li-ping XIA Tao |
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| Affiliation: | YANG Dong-qing~1,WANG Yun-sheng~2,SUN Mei-lian~1,SHAN Yu~1,LUO Yang~2,WEI Chao-ling~1,GAO Li-ping~(2*),XIA Tao~(1*) (1.Key Laboratory of Tea Biochemistry and Biotechnology,Ministry of Agriculture,Anhui Agricultural University,Hefei 230036,Anhui,China,2.School of Biology Science,China) |
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| Abstract: | Obtaining high quality total RNA is an important prerequisite for studying genomics and functional genomics of tea plant.It is hard to extract high quality total RNA from tea due to the interference of RNase,and polyphenols.Aiming at the drawbacks in extracting method for total RNA of tea plant,a comparative study was carried out to determine material dosage,extracting buffer,protein extracting solution,precipitating reagent for extracting total RNA,in this paper. The simple CTAB-LiCl method was established... |
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| Keywords: | tea plant(Camellia sinensis(L.) O.Kuntze) total RNA organs extracting method CTAB-LiCl method |
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