| 口蹄疫病毒泛亚型O/CHINA/99株全长cDNA分子克隆构建和感染性鉴定 |
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| 引用本文： | 吕建亮,张永光,王永录,潘丽,刘力宽,方玉珍,蒋守田,张维德. 口蹄疫病毒泛亚型O/CHINA/99株全长cDNA分子克隆构建和感染性鉴定[J]. 病毒学报, 2009, 25(1): 58-62 |
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| 作者姓名： | 吕建亮 张永光 王永录 潘丽 刘力宽 方玉珍 蒋守田 张维德 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046;中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046 |
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| 基金项目： | 甘肃省自然科学基金项目(2007GS04449) |
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| 摘 要： | 设计并合成了O型口蹄疫泛亚型代表毒株O/CHINA/99基因组9条引物,利用RT-PCR扩增各基因片段,酶切后连到pOK-12载体上,经酶切、PCR和序列测定表明,O/CHINA/99全基因组由8 200个核苷酸组成,构建的感染性cDNA与原毒株的序列同源性为99.1%;利用T7 RNA聚合酶系统进行体外转录,转录产物RNA用脂质体转入BHK-21细胞传代培养,可观察到典型的FMDV致细胞病变效应;拯救病毒接种2日龄乳鼠后,可出现典型的临床症状,并于16～48h内死亡。以上结果表明,O/CHINA/99株全长cDNA分子克隆构建成功,并从构建的全长cDNA拯救出了口蹄疫病毒。
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| 关 键 词： | 口蹄疫病毒 全长cDNA 反向遗传学 |
Construction and Identification of Infectious Molecular Clone of Foot-and-Mouth Disease Virus Strain O/CHINA/99 |
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| LV Jian-liang,ZHANG Yong-guang,WANG Yong-lu,PAN Li,LIU Li-kuan,JIANG Shou-Tian,ZHANG Wei-de. Construction and Identification of Infectious Molecular Clone of Foot-and-Mouth Disease Virus Strain O/CHINA/99[J]. Chinese journal of virology, 2009, 25(1): 58-62 |
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| Authors: | LV Jian-liang ZHANG Yong-guang WANG Yong-lu PAN Li LIU Li-kuan JIANG Shou-Tian ZHANG Wei-de |
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| Affiliation: | Lanzhou Veterinary Research Institute;Chinese Academy of Agricultural Sciences;State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology;Key Laboratory of Animal Virology of Agriculture;Lanzhou 730046;China |
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| Abstract: | Nine primers were designed for the full-length genome of O/CHINA/99 and each sequence fragment was obtained by RT-PCR,and cloned into pOK12 vecter,the full-length genome cDNA clone of O/CHINA/99 was identified by restriction enzymes digestion,PCR,and the whole genome sequencing.The results showed that the O/CHINA/99 whole genome was formed with the length of 8,200nt.The nucleotide sequence of the full-length cDNA shared 99.1% homology with its prototype.RNA synthesized in vitro by means of a bacteriophage T... |
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| Keywords: | FMDV full-length cDNA reverse genetics |
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