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| 黑曲霉W3350脯氨酰内肽酶在大肠杆菌中的表达 | |
| 引用本文： | 周丽娜,张鹭,路福平,王晓娟,杨剑芳.黑曲霉W3350脯氨酰内肽酶在大肠杆菌中的表达[J].生物技术,2008,18(2):15-17. |
| 作者姓名： | 周丽娜 张鹭 路福平 王晓娟 杨剑芳 |
| 作者单位： | 1. 天津市工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津,300457;齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,黑龙江,齐齐哈尔,161006 2. 齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,黑龙江,齐齐哈尔,161006 3. 天津市工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院,天津,300457 |
| 摘 要： | 目的：构建pET-PEP重组原核表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法：采用RT-PCR技术从黑曲霉（Aspergillus niger）W3350中扩增出脯氨酰内肽酶（PEP）的基因,插入表达载体pET-22b（＋）,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和DNA序列测定验证,将正确的重组质粒转入大肠杆菌BL21（DE3）中,IPTG（终浓度1mmol/L）诱导获得表达。结果：表达产物进行超声破碎,经SDS-PAGE电泳检测,PEP分子质量大约为57kDa,与理论值相符,通过酶活方法测定脯氨酰内肽酶酶活为0.656U/ml,约是出发菌株的5倍。结论：首次成功构建表达载体pET-PEP并在原核细胞中表达,为进一步研究PEP的生物学功能奠定了基础。 |
| 关 键 词： | RT-PCR 黑曲霉 脯氨酰内肽酶 基因表达 |
| 文章编号： | 1004-311X(2008)02-0015-03 |
| 修稿时间： | 2007年11月29 |
Expression of PEP of Aspergillus niger W3350 in E.coli |
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| ZHOU Li-na,ZHANG Lu,LU Fu-ping,WANG Xiao-juan,YANG Jian-fang.Expression of PEP of Aspergillus niger W3350 in E.coli[J].Biotechnology,2008,18(2):15-17. | |
| Authors: | ZHOU Li-na ZHANG Lu LU Fu-ping WANG Xiao-juan YANG Jian-fang |
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