| 红曲霉DNA提取及其RAPD-PCR反应体系的建立 |
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| 引用本文： | 袁勇芳,许杨,李思光,汤祖辉.红曲霉DNA提取及其RAPD-PCR反应体系的建立[J].生物技术,2002,12(1):2-4. |
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| 作者姓名： | 袁勇芳 许杨 李思光 汤祖辉 |
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| 作者单位： | 1. 江西中德联合研究院,江西,南昌,330047
2. 南昌大学生命与食品工程学院,江西,南昌,330047 |
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| 基金项目： | 江西省自然科学基金资助项目 (0 1 30 0 1 2 ) |
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| 摘 要： | 采用改进的氯化苄法对红曲霉DNA进行提取纯化，探讨了提取液中EDTA的浓度以及其他因素对提取结果的影响。同时，以该法提取的DNA为模板，采用正交实验优化RAPD分析最佳反应条件。结果表明，当提取液中EDTA浓度为125mmol/l时，所得的红曲霉DNA的质量和数量均较理想，每克红曲霉菌丝体（湿重）能提取到50μg的DNA，分子量约为25kb，以此DNA为模板进行PCR扩增，其最佳反应体系为：Mg^2 2.0mmol/l,dNTPs 0.15mmol/l,Taq 0.05U/μl，模板DNA 1.2ng/μl，随机引物0.36μmol/l,Tris-HCl 10mmol/l pH9.0,KCl 50mmol/l,Nonidet P40 0.1%。另外，通过对比RAN酶消化前后的模板扩增结果证明了本实验酶的消化的必要性，对比了不同预变性时间处理模板对RAPD－PCR扩增的影响，发现不经过预变性的模板扩增结果最理想。
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| 关 键 词： | 红曲霉 RAPD－PCR DNA提取 氯化苄法 反应体系 |
| 文章编号： | 1004-311X(2002)01-0002-03 |
| 修稿时间： | 2001年2月21日 |
Extraction of DNA from Monascus and determination of the optimal amplification condition for RAPD-PCR |
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| YUAN Yong-fang,XU Yang ,LI Si-guang ,TANG Zu-hui.Extraction of DNA from Monascus and determination of the optimal amplification condition for RAPD-PCR[J].Biotechnology,2002,12(1):2-4. |
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| Authors: | YUAN Yong-fang XU Yang LI Si-guang TANG Zu-hui |
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| Institution: | YUAN Yong-fang,XU Yang 1,LI Si-guang 2,TANG Zu-hui 1 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Monascus RAPD-PCR DNA extraction benzyl chloride |
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