编码腈水解酶的大豆疫霉基因PsNIA的克隆与转录分析

包括大豆在内的许多植物都可以产生氰化物，对侵染的病原菌产生毒害作用而阻碍其进一步扩展。采用抑制性差减杂交(suppression subtractive hybridization，SSH)的方法，筛选到一个在大豆疫霉侵染早期上调表达的、编码腈水解酶的cDNA片段；克隆了该基因的全长序列，命名为PsNIA。Southern杂交结果显示，PsNIA在大豆疫霉基因组中只有1个拷贝。系统发育分析表明，PsNIA与绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa的腈水解酶的序列同源性最高，且该基因编码的氨基酸序列具有腈水解酶的保守结构域。RT-PCR分析表明，该基因在大豆疫霉侵染大豆12h时可以检测到转录。