| 白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合基因的克隆及高效表达 |
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| 引用本文： | 高基民, 黄洪莲, 王小宁, 徐舲飞, 郑仲承, 刘新垣,. 白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素融合基因的克隆及高效表达[J]. 生物工程学报, 1996, 12(2): 129-133 |
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| 作者姓名： | 高基民 黄洪莲 王小宁 徐舲飞 郑仲承 刘新垣 |
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| 作者单位： | 第一军医大学免疫教研室，第一军医大学免疫教研室，第一军医大学免疫教研室，中国科学院上海生物化学研究所，中国科学院上海生物化学研究所，中国科学院上海生物化学研究所 广州 510515，广州 510515，广州 510515，上海 200031，上海 200031，上海 200031 |
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| 基金项目： | “863”、国家自然科学基金，全国青年科学基金，广东省青年科学基金 |
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| 摘 要： | 利用聚合酶链式反应和寡核苷酸介导的定向诱变技术构建了白细胞介素2-绿脓杆菌外毒素IL2-PE40、IL2-PE40KDEL、IL2-PE66~(4Glu)和IL2-PE66~(4Glu)KDEL融合基因的原核表达重组质粒,并实现了高效表达,表达产物占菌体总可溶蛋白的20％～30％。此外,由于这一表达质粒在IL-2cDNA与PE基因连接处引入了唯一的SmaⅠ位点,其5＇、3＇端分别含有唯一的EcoRⅠ、PstⅠ位点,因此可方便地用其它基因替换IL-2或PE基因而获得相应融合蛋白的表达质粒。
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| 关 键 词： | 白细胞介素-2 绿脓杆菌外毒素 融合蛋白 原核表达 细胞毒作用 |
Cloning and High Level Expression of Interleukin 2-pseudomonas Exotoxin Fusion Gene in Escherichia coli |
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| Gao Jimin Huang Honglian Wang Xiaoning. Cloning and High Level Expression of Interleukin 2-pseudomonas Exotoxin Fusion Gene in Escherichia coli[J]. Chinese journal of biotechnology, 1996, 12(2): 129-133 |
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| Authors: | Gao Jimin Huang Honglian Wang Xiaoning |
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| Abstract: | Using PCR and oligonucleotide-directed mutagenesis, recombinant plasmidswhich express IL2-PE fusion genes, such as IL2-PE40, IL2-PE40KDEL, IL2-PE664Ght and IL2-PE664GlnKDEL, were constructed and expressed in E. colt at high level; 20-30 percent of total soluble bacterial proteins are the fusion protein. They exist as inclusion bodies in E. coli. In addition , there are unique EcoR I , Pst I and Sma I sites , respectively, in these expression vectors, so it will be conveniently changed to another expression vectors which contain other cytokines or toxins. |
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| Keywords: | Interleukin 2 pseudomonas exotoxin fusion protein gene expression cyto-toxicity |
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