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带有sop基因稳定表达载体的构建
引用本文:杜笑寒, 丁久元, 吴夏英, 余志华, 门大鹏,. 带有sop基因稳定表达载体的构建[J]. 生物工程学报, 1996, 12(2): 140-147
作者姓名:杜笑寒   丁久元   吴夏英   余志华   门大鹏  
作者单位:中国科学院微生物研究所; 中国科学院微生物研究所 北京;
摘    要:F质粒的第五个EcoRⅠ片段mini-F具有质粒的分配功能。其EcoRⅠ-BamHⅠ片段含有oriS、ccd、repD和sop基因(sopA,B和C)。该片段与pBR322重组,得到质粒pDMC32。pDMC32经SmaⅠ酶切,T4连接酶连接,得到衍生质粒pDMC311,消除了oriS、ccd和repD片段。MI32(pDMC32)和MI311(pDMC311),在液体限磷基础培养基中培养100代,质粒保持率分别为93%和100%。而对照MIR322(pBR322)培养55代时,质粒保持率仅为10%。带有色氨酸启动子质粒pDR720与pBR322重组,得到质粒pDMC40。pDMC40再与mini-F的sop基因重组,得到带有sop基因的稳定表达质粒pDMC48。MI48(pDMC48)在液体限磷基础培养基中培养100代,质粒保持率为100%。

关 键 词:sop基因   质粒稳定性   mini-F   稳定质粒  

Construction of a Stable Expression Vector Carrying sop Genes
Abstract:
Keywords:sop genes   stability of plasmid   mini-F   stable plasmid
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