| 鳞状细胞癌抗原SCCA基因的构建、表达及鉴定 |
| |
| 引用本文： | 于华实,孙晓琳,张天竹,李梅,李淑珍,唐晓波.鳞状细胞癌抗原SCCA基因的构建、表达及鉴定[J].现代生物医学进展,2013,13(18):3420-3423. |
| |
| 作者姓名： | 于华实 孙晓琳 张天竹 李梅 李淑珍 唐晓波 |
| |
| 作者单位： | 哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室 黑龙江哈尔滨150081 |
| |
| 基金项目： | 哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目 |
| |
| 摘 要： | 目的:重组人鳞状细胞癌抗原(SCCA)的基因及表达融合蛋白,为下一步建立新的肝癌诊断方法奠定基础.方法:提取子宫颈癌细胞株(hela)中的总RNA,应用RT-PCR、PCR等技术扩增出SCCA基因,将其分别与PET-32a及PGEX-4T-1载体连接,转化入DH5α菌中进行克隆,并测序鉴定.异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导转入工程质粒的BL21菌中表达SCCA融合蛋白(分别含有HIS,GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定.结果:经RT-PCR、PCR扩增后成功获得一条450bp的DNA片段,经测序鉴定与预期序列一致；并成功在大肠杆菌中实现了高表达,经Western blotting鉴定为SCCA融合蛋白.结论:成功获得SCCA目的基因并获得高纯度的SCCA融合蛋白,为进一步开发针对肝癌的SCCA诊断试剂打下基础,开辟诊断肝癌新途径.
|
| 关 键 词： | 肝癌 SCCA基因 克隆 表达 |
Construction and Expression of SCCA Fusion Protein |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Hepatocellular carcinomas SCCA gene Cloning Expression |
| 本文献已被 万方数据 等数据库收录！ |
|
