|
|||||
|
|
| 小鼠CDC26基因短发夹RNA重组腺病毒载体的构建与表达分析 | |
| 引用本文： | 程然然,闫永红,弓蒙蒙,曹培丽,贺福初,王晓晖.小鼠CDC26基因短发夹RNA重组腺病毒载体的构建与表达分析[J].生物技术通讯,2014,25(5):656-659. |
| 作者姓名： | 程然然 闫永红 弓蒙蒙 曹培丽 贺福初 王晓晖 |
| 作者单位： | 1. 北京工业大学生命科学与生物工程学院,北京,100124 2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室,北京102206 3. 北京工业大学生命科学与生物工程学院,北京100124;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京蛋白质组研究中心蛋白质组学国家重点实验室,北京102206 |
| 摘 要： | 目的:构建靶向CDC26基因的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒载体,干扰小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)中CDC26的表达。方法:设计小鼠靶向CDC26基因的shRNA,插入穿梭质粒pENTRY-EF1a-EGFP-Mir30,通过Gateway系统获得重组腺病毒载体pAd-CDC26-shRNA;线性化后转染HEK293A细胞,进行病毒包装;用包装的重组腺病毒感染MEF,24 h后收集细胞,提取总RNA,逆转录后用荧光定量PCR法检测MEF内CDC26 mRNA的变化,以检测所设计shRNA的敲低效率。结果:构建的重组腺病毒载体pAd-CDC26-shRNA经酶切鉴定后正确;转染HEK293A细胞后8 d,观察到细胞病变及GFP的大量表达,表明重组腺病毒包装成功;感染MEF后,实时荧光定量PCR检测表明,细胞内CDC26 mRNA的水平较对照组敲低了73.14%,腺病毒注射7 d后,注射CDC26 shRNA的小鼠血糖较对照组明显降低。结论:构建了具有较高敲低效果的小鼠CDC26基因shRNA重组腺病毒,并且具有体内活性。 |
| 关 键 词： | CDC26 短发夹RNA 腺病毒 血糖 |
Construction of Adenovirus Vector and Express Analysis of shRNA Against Mouse CDC26 Gene |
|
| CHENG Ran-Ran,YAN Yong-Hong,GONG Meng-Meng,CAO Pei-Li,HE Fu-Chu,WANG Xiao-Hui.Construction of Adenovirus Vector and Express Analysis of shRNA Against Mouse CDC26 Gene[J].Letters in Biotechnology,2014,25(5):656-659. | |
| Authors: | CHENG Ran-Ran YAN Yong-Hong GONG Meng-Meng CAO Pei-Li HE Fu-Chu WANG Xiao-Hui |
| Institution: | CHENG Ran-Ran, YAN Yortg-Hong, GONG Meng-Meng, CAO Pei-Li, HE Fu-Chu, WANG Xiao-Hui( 1. College of Life Science and Bio-engineering, Beijing University of Technology, Beijing 100124; 2. Beijing Insti- tute of Radiation Medicine, State Key Laboratory of Proteomics, Beijing Proteome Research Center, Beijing 102206; China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | CDC26 short hairpin RNA recombinant adenovirus blood level |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |