| 大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究 |
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| 引用本文： | 孙朝晖,赖燕来,曾文文,郭雅南,左焕琮,谢佐平.大鼠Shh-N融合蛋白的表达、纯化及功能研究[J].生物化学与生物物理进展,2003,30(6):969-973. |
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| 作者姓名： | 孙朝晖 赖燕来 曾文文 郭雅南 左焕琮 谢佐平 |
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| 作者单位： | 清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京,100084 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30070245）. |
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| 摘 要： | 为了获得重组Sonic hedgehog N端蛋白（Shh-N）并研究其功能，应用PCR技术扩增Shh-N cDNA，然后克隆至原核表达质粒中，转化E.coli后获得表达菌株, 经1 mmol/L IPTG诱导高效表达出带有His-tag的融合蛋白，其中大部分为可溶性蛋白，少量为包涵体.用His-tag特异性结合树脂纯化可溶性融合蛋白，经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一区带，凝胶自动扫描分析表明，Shh-N的纯度达85%以上.纯化后的Shh-N在成纤维生长因子8(FGF8)的协同作用下，能诱导神经前体细胞（NPC）向酪氨酸羟化酶阳性神经元（TH+）发育.在此基础上可以诱导不同类型的人类干细胞定向分化为多巴胺(DA)神经元，从而为临床治疗帕金森病（PD）提供充足的供体细胞.
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| 关 键 词： | Shh-N，重组融合蛋白，蛋白质纯化，神经前体细胞，TH免疫阳性神经元 |
| 收稿时间： | 4/8/2003 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 6/2/2003 12:00:00 AM |
Cloning,Expression, Purification and Biological Activity Analysis of Rat Sonic Hedgehog N-terminal Genes |
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| SUN Zhao-Hui,LAI Yan-Lai,ZENG Wen-Wen,GUO Ya-Nan,ZUO Huan-Cong and XIE Zuo-Ping.Cloning,Expression, Purification and Biological Activity Analysis of Rat Sonic Hedgehog N-terminal Genes[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2003,30(6):969-973. |
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| Authors: | SUN Zhao-Hui LAI Yan-Lai ZENG Wen-Wen GUO Ya-Nan ZUO Huan-Cong and XIE Zuo-Ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sonic hedgehog N-terminal protein fusion protein protein purification neural progenitor cells TH+ neurons |
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