| 免疫抑制剂地塞米松可明显延长乙型肝炎病毒抗原在水动力法转染HBV小鼠模型中的表达 |
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| 引用本文： | 郭燕菊,王文,孙世惠,曾道炳,赵光宇,于虹,郭彦,谭文杰,卢实春,周育森. 免疫抑制剂地塞米松可明显延长乙型肝炎病毒抗原在水动力法转染HBV小鼠模型中的表达[J]. 病毒学报, 2010, 26(1): 20-26 |
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| 作者姓名： | 郭燕菊 王文 孙世惠 曾道炳 赵光宇 于虹 郭彦 谭文杰 卢实春 周育森 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院,微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071;解放军第305医院,检验科,北京,100009;中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,病毒基因工程国家重点实验室,北京,100050;军事医学科学院,微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071;军事医学科学院,微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071;首都医科大学,附属北京佑安医院,肝胆外科,北京,100069;首都医科大学,附属北京佑安医院,肝胆外科,北京,100069 |
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| 基金项目： | 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治科技重大专项(2009ZX10004-401);;重大新药创制科技重大专项(2009ZX09102-237) |
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| 摘 要： | 建立基于高压水动力法的乙型肝炎病毒(HBV)转染小鼠模型,并进一步建立和优化乙肝动物模型研究方法。首先构建了含腺相关病毒倒转末端重复序列元件与包含1.3个拷贝HBV基因组(ayw亚型)的HBV表达质粒(pAAV-HBV1.3);并将pAAV-HBV1.3质粒经高压水动力法尾静脉注射C57BL/6小鼠,不同时间点采集血液和肝组织标本,ELISA检测血清HBsAg、HBeAg表达;Real-time PCR检测血清及肝组织病毒载量;HE染色、免疫组化染色检测肝组织病理学改变及病毒抗原在肝组织中的定位及表达;最后采用免疫抑制剂地塞米松注射液(DEX)腹腔注射小鼠,建立免疫功能抑制小鼠模型,在此基础上制备乙肝病毒转染小鼠模型,并进行血清HBsAg、HBeAg检测。结果是正常免疫状态下,小鼠转染pAAV-HBV1.3 10d时血清及肝组织HBV相关抗原阳性,30d后HBV相关抗原检测阴性,但30d和60d血清及肝组织病毒载量检测均为阳性,且与对照组差异显著(P0.01,P0.05);经地塞米松注射后处于免疫抑制状态下的高压水动力法建立的乙肝病毒转染小鼠,则在60d仍可检测到HBsAg、HBeAg的表达。以上结果表明通过高压水动力法建立了急性乙肝小鼠模型,通过抑制小鼠免疫状态,可延长病毒在小鼠体内存留时间。该模型建立为HBV疫苗评价、药物开发及乙肝相关致病机理研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 水动力法 动物模型 乙型肝炎病毒 地塞米松 |
Immunosuppressant Dexamethasone Can Significantly Extend the Expression of Hepatitis B Virus Antigens in the HBV Mouse Model by Hydrodynamic Transfection Method |
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| Abstract: | To develop a HBV infection mouse model by hydrodynamic-based transfection and further to optimize the method of development of HBV infection mouse model.We first developed a construct which contained inverted terminal repeat elements(ITR) of adeno-associated virus(AAV) and 1.3 copies of HBV genome(ayw subtype).The pAAV-HBV1.3 DNA was then injected hydrodynamically into the tail veins of C57BL/6 mice in 5 seconds.The virus load in serum and liver was assayed by ELISA and Real-time PCR.The expression of virus... |
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| Keywords: | Hydrodynamic animal model Hepatitis B virus dexamethasone |
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