| β-葡萄糖苷酶与透明颤菌血红蛋白在大肠杆菌中的共表达 |
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| 作者姓名： | 邓发军 潘宇 常飞 房伟 方泽民 肖亚中 |
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| 作者单位： | 安徽大学 现代生物制造安徽省重点实验室 安徽省微生物与生物催化工程研究中心，安徽 合肥 230601,安徽大学 现代生物制造安徽省重点实验室 安徽省微生物与生物催化工程研究中心，安徽 合肥 230601,安徽大学 现代生物制造安徽省重点实验室 安徽省微生物与生物催化工程研究中心，安徽 合肥 230601,安徽大学 现代生物制造安徽省重点实验室 安徽省微生物与生物催化工程研究中心，安徽 合肥 230601,安徽大学 现代生物制造安徽省重点实验室 安徽省微生物与生物催化工程研究中心，安徽 合肥 230601,安徽大学 现代生物制造安徽省重点实验室 安徽省微生物与生物催化工程研究中心，安徽 合肥 230601 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2014AA093515)，国家自然科学基金 (No. 31300062)，大学生科研训练计划项目 (No. 201510357026) 资助。 |
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| 摘 要： | 为解决大肠杆菌高密度发酵生产β-葡萄糖苷酶过程中溶氧不足的问题,分别采用双顺反子和T7启动子系统在Escherichia coli中引入透明颤菌血红蛋白(VHb)以改善溶氧的利用、提高菌体的生物量,进而增加β-葡萄糖苷酶的产量。以双顺反子形式诱导表达VHb时,在摇瓶低溶解氧条件下的最高生物量达到4.24±0.29(OD_(600)),与无VHb表达的对照组相比提高了35.03%,同时β-葡萄糖苷酶发酵酶活达到了(9.78±0.55)U/m L,比对照组提高了25.38%。在3 L发酵罐中使用双顺反子形式共表达VHb时,β-葡萄糖苷酶发酵总酶活达到141.23 U/m L,与无VHb表达的对照相比提高了35.57%。以T7启动子对VHb进行表达后,在摇瓶和发酵罐中β-葡萄糖苷酶的发酵酶活均低于对照组。这些结果表明,在大肠杆菌中以双顺反子形式共表达β-葡萄糖苷酶和VHb能够提升菌体对低溶氧的耐受能力,提高菌体生物量和β-葡萄糖苷酶的产量。
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| 关 键 词： | β-葡萄糖苷酶，大肠杆菌，透明颤菌血红蛋白 (VHb)，双顺反子 |
| 收稿时间： | 2017-05-14 |
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