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PDGF-B免疫原的制备及其腹水抗体对HepG2细胞增殖的影响
引用本文:范修德,李娜,王西强,孙文刚,李倩,李汉超,王小云,贾皑. PDGF-B免疫原的制备及其腹水抗体对HepG2细胞增殖的影响[J]. 生物工程学报, 2018, 34(3): 396-406
作者姓名:范修德  李娜  王西强  孙文刚  李倩  李汉超  王小云  贾皑
作者单位:1 西安交通大学第一附属医院感染性疾病科,陕西 西安 710061,2 西安交通大学第一附属医院康复医学科,陕西 西安 710061,3 西安交通大学第一附属医院心血管内科,陕西 西安 710061,4 西安交通大学第一附属医院风湿免疫科,陕西 西安 710061,4 西安交通大学第一附属医院风湿免疫科,陕西 西安 710061,4 西安交通大学第一附属医院风湿免疫科,陕西 西安 710061,5 西安交通大学第一附属医院消化内科,陕西 西安 710061,5 西安交通大学第一附属医院消化内科,陕西 西安 710061
基金项目:陕西省社会发展攻关项目 (No. S2013SF3884) 资助。
摘    要:观察利用融合表达载体pET28-Trx合成的人血小板源性生长因子B(Human platelet-derived growth factor B,h PDGF-B)免疫原的免疫原性,及其诱导小鼠产生针对h PDGF-B的腹水抗体对人HepG2细胞增殖的抑制作用。本研究首先选择hPDGF-B的第103–118及152–167氨基酸序列作为抗原表位,构建p ET28-Trx-重组原核表达载体,表达并纯化获得6×his Trx-h PDGF-BΔ103-118及6×his Trx-h PDGF-BΔ152-167重组蛋白;然后使用纯化后的重组蛋白免疫小鼠,并给予腹腔注射H22肿瘤细胞制备腹水抗体,ELISA法检测抗体滴度,Western blotting法检测纯化腹水抗体与膜结合的PDGF-B结合能力;最后通过CCK8实验检测外源性PDGF-BB和两种纯化腹水抗体对肝癌Hep G2细胞增殖的作用。研究发现上述两种重组蛋白作为免疫原均可诱导小鼠产生高滴度的PDGF-B中和性抗体;两种h PDGF-B纯化腹水抗体能明显抑制PDGF-BB对肝癌Hep G2细胞增殖的促进作用。结果提示,Trx-PDGF-B重组蛋白作为免疫原有望为PDGF-B疫苗的制备提供新的方法,也为临床上肝癌的治疗提供了一种新的思路。

关 键 词:肝细胞癌,PDGF-B,多克隆抗体,细胞因子疫苗
收稿时间:2017-08-17

PDGF-B immunogen preparation and the suppressive effect of anti-PDGF-B ascite antibody on the proliferation of hepG2 cells
Xiude Fan,Na Li,Xiqiang Wang,Wengang Sun,Qian Li,Hanchao Li,Xiaoyun Wang and Ai Jia. PDGF-B immunogen preparation and the suppressive effect of anti-PDGF-B ascite antibody on the proliferation of hepG2 cells[J]. Chinese journal of biotechnology, 2018, 34(3): 396-406
Authors:Xiude Fan  Na Li  Xiqiang Wang  Wengang Sun  Qian Li  Hanchao Li  Xiaoyun Wang  Ai Jia
Abstract:
Keywords:hepatocellular carcinoma (HCC)   PDGF-B   polyclonal antibody   cytokine vaccine
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