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锌指蛋白ZFP580在全反式维甲酸调节大鼠血管平滑肌细胞迁移中的作用及机制
引用本文:吴国栋,陈凯,张晶晶,韦淑萍,张梅,张文成. 锌指蛋白ZFP580在全反式维甲酸调节大鼠血管平滑肌细胞迁移中的作用及机制[J]. 中国应用生理学杂志, 2020, 36(1): 45-50. DOI: 10.12047/j.cjap.5806.2020.010
作者姓名:吴国栋  陈凯  张晶晶  韦淑萍  张梅  张文成
作者单位:1.武警后勤学院, 天津 300309;2. 天津市肝脏胰腺纤维化与分子诊疗实验室, 天津 300162;3. 武警后勤学院卫勤系人体形态学教研室, 天津 300309;4. 武警特色医学中心心内科, 天津 300162
基金项目:国家自然科学基金(813700439);天津市自然科学基金(16JCZDJC31900)。
摘    要:目的:探讨锌指基因ZFP580在全反式维甲酸(ATRA)调节VSMCs迁移功能中的作用及其机制。方法:分离,培养并鉴定大鼠主动脉VSMCs;分别予以0、5、10、20 μmol/L ATRA刺激VSMCs 24h,以0 μmol/L ATRA组为对照组,观察不同溶度ATRA刺激不同时间对VSMCs迁移能力的影响或给予0、20 μmol/L ATRA刺激VSMCs 24、48、72h,观察ATRA刺激不同时间对VSMCs迁移能力的影响;QPCR及Western blot检测ATRA刺激VSMCs后ZFP580的mRNA和蛋白表达变化;应用ERK抑制剂PD98059抑制ERK的蛋白表达,观察ERK信号蛋白表达变化对ATRA刺激后ZFP580蛋白表达的影响;腺病毒转染技术获得过表达或低表达ZFP580的VSMCs,QPCR及Western blot检测MMP-2和MMP-9、ZFP580蛋白和mRNA表达水平。结果:分离的VSMCs在培养10d后,免疫荧光显示平滑肌细胞特异性标记物SM22α抗体阳性。与对照组相比,5、10、20 μmol/L ATRA预刺激分别降低了32%、43%和59%的VSMCs迁移能力;20 μmol/L ATRA刺激VSMCs与对照组相比,在24、48、72h分别降低49%、36%和22%细胞迁移能力。ZFP580的mRNA和蛋白表达随着ATRA刺激溶度的增加和刺激时间的延长而升高。ERK在ATRA刺激15min即显著升高,运用ERK抑制剂PD98059(20 μmol/L)预处理抑制ERK蛋白表达并降低了ATRA诱导ZFP580的蛋白表达。过表达ZFP580降低MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白表达,反之,低表达ZFP580则上调了MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白表达。结论:ATRA可通过ERK信号通路上调ZFP580的表达,而ZFP580通过调控MMP-2和MMP-9的表达参与ATRA对VSMCs迁移的抑制作用。

关 键 词:ZFP580  血管平滑肌细胞  全反式维甲酸  迁移  大鼠  

The role of ZFP580 in the regulation of rat VSMCs migration by ATRA and its mechanism
WU Guo-dong,CHEN Kai,ZHANG Jing-jing,WEI Shu-ping,ZHANG Mei,ZHANG Wen-cheng. The role of ZFP580 in the regulation of rat VSMCs migration by ATRA and its mechanism[J]. Chinese journal of applied physiology, 2020, 36(1): 45-50. DOI: 10.12047/j.cjap.5806.2020.010
Authors:WU Guo-dong  CHEN Kai  ZHANG Jing-jing  WEI Shu-ping  ZHANG Mei  ZHANG Wen-cheng
Affiliation:1. Logistics University of Chinese People’s Armed Police Force, Tianjin 300309;2. Tianjin Key Laboratory of Molecular Diagnosis and Treatment in Hepatic and Pancreatic Fibrosis, Tianjin 300162;3. Department of Human Morphology, Logistics University of Chinese People’s Armed Police Force, Tianjin 300309;4. Department of Cardiology, Logistics University of Chinese People’s Armed Police Force, Tianjin 300162, China
Abstract:
Keywords:ZFP580  vascular smooth muscle cells  all-trans retinoic acid  migration  mouse
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