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盐穗木HcDMC1的原核表达和抗血清的制备
引用本文:张冀,张丽丽,张贝贝,张富春.盐穗木HcDMC1的原核表达和抗血清的制备[J].植物研究,2018,38(3):399-405.
作者姓名:张冀  张丽丽  张贝贝  张富春
作者单位:1. 新疆大学生命科学与技术学院, 乌鲁木齐 830046;
2. 新疆生物资源基因工程重点实验室, 乌鲁木齐 830046
基金项目:新疆重点实验室专项资金资助项目(2014KL001)
摘    要:DMC1是减数分裂过程中同源染色体配对和重组修复所必需的减数分裂特异蛋白。根据盐胁迫下盐穗木转录组数据库,克隆获得的盐穗木DNA损伤修复基因命名为HcDMC1。为深入分析盐穗木HcDMC1基因的耐盐功能,通过原核表达获得盐穗木HcDMC1的融合蛋白,用于免疫小鼠制备特异性的HcDMC1抗血清。结果表明,利用pET30a-HcDMC1能够在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达融合蛋白His-HcDMC1,纯化融合蛋白His-HcDMC1的含量为1.0 mg·mL-1。每次每只小鼠免疫接种50 μg融合蛋白,三次免疫接种后进行抗体效价及特异性检测。ELISA检测抗血清滴度约为1:400 000,Western Blot检测证明了抗血清的特异性。本研究制备的小鼠抗血清能够为盐穗木HcDMC1蛋白的功能鉴定和免疫检测提供实验材料。

关 键 词:盐穗木  HcDMC1  原核表达  融合蛋白  抗血清  
收稿时间:2017-08-30

Prokaryotic Expression of Halostachys caspica HcDMC1 and Preparation of Its Antiserum
ZHANG Ji,ZHANG Li-Li,ZHANG Bei-Bei,ZHANG Fu-Chun.Prokaryotic Expression of Halostachys caspica HcDMC1 and Preparation of Its Antiserum[J].Bulletin of Botanical Research,2018,38(3):399-405.
Authors:ZHANG Ji  ZHANG Li-Li  ZHANG Bei-Bei  ZHANG Fu-Chun
Institution:1. College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046;
2. Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, Urumqi 830046
Abstract:
Keywords:Halostachys caspica  HcDMC1  prokaryotic expression  fusion protein  antiserum  
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