| 大口黑鲈amh基因全长cDNA克隆、表达及多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 李兵部,曹哲明,陶易凡,徐钢春,许爱国,李鸣霄,张红英,陈诗扬,强俊,徐跑.大口黑鲈amh基因全长cDNA克隆、表达及多克隆抗体制备[J].水生生物学报,2023,47(5):775-785. |
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| 作者姓名： | 李兵部 曹哲明 陶易凡 徐钢春 许爱国 李鸣霄 张红英 陈诗扬 强俊 徐跑 |
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| 作者单位： | 1.中国水产科学研究院淡水渔业研究中心214081;2.中国农业科学院研究生院100081;3.苏州金澄福渔业科技有限公司215121; |
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| 基金项目： | 江苏省种业振兴“揭榜挂帅”项目(JBGS[2021]130)；加州鲈产业重大技术协同推广计划(2022-ZYXT-07)；苏州市科技计划项目(SNG2021009)资助。 |
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| 摘 要： | 为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)抗缪勒氏管激素(amh)基因的表达及其在性腺发育中的潜在作用,研究利用RACE技术克隆得到了大口黑鲈amh基因,并制备Amh多克隆抗体,通过qRT-PCR、Western Blot分析Amh在大口黑鲈不同组织和不同发育阶段性腺中的表达模式,最后利用HE染色法和免疫组化观察不同发育阶段性腺的形态组织学变化及其与Amh表达的潜在关系。结果显示:大口黑鲈amh基因cDNA序列全长2050 bp,由24 bp5′非编码区、394 bp3′非编码区和1632 bp的开放阅读框组成,共编码543个氨基酸。amh基因mRNA在大口黑鲈11个组织中均有表达,其中雄鱼精巢中表达量最高,肌肉次之,雌鱼卵巢中表达量最高,肌肉次之。amh基因在雌雄鱼不同发育阶段的性腺中表达存在显著差异,精巢中表达量均显著高于卵巢(P<0.05)。同时, Western Blot结果显示Amh蛋白在精巢中表达丰度较高。amh基因在精巢中的表达量呈先上升后下降的趋势,且在孵化后65d鱼精巢中其表达量达到最高(P<0.05),免疫组化结果显示Amh表达于早期精...
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| 关 键 词： | amh 基因克隆 组织表达 多克隆抗体 性腺发育 大口黑鲈 |
| 收稿时间： | 2021-11-22 |
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