| 乙型肝炎病毒DNA聚合酶反式调节蛋白HBVDNAPTP1的表达、纯化与初步鉴定 |
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| 引用本文： | 阎秀丽,伦永志,王芳,冯洁,迟庆.乙型肝炎病毒DNA聚合酶反式调节蛋白HBVDNAPTP1的表达、纯化与初步鉴定[J].中国微生态学杂志,2011,23(3):226-229. |
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| 作者姓名： | 阎秀丽 伦永志 王芳 冯洁 迟庆 |
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| 作者单位： | 大连大学医学院,辽宁省高校生物物理学重点实验室,辽宁,大连,116622 |
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| 摘 要： | 目的构建HBVDNAPTP1基因的原核表达载体,诱导其在大肠埃希菌中表达,并对融合蛋白进行纯化。方法利用逆转录-PCR获得乙型肝炎病毒(HBV)DNA聚合酶(Polymerase)反式调节人类新基因HBVD-NAPTP1,测序正确后插入至原核表达载体pET-32a(+)中,转化BL21(DE3)宿主菌进行诱导,并利用组氨酸亲和层析方法对融合蛋白进行纯化。结果 HBVDNAPTP1原核表达载体转化宿主菌后,经0.5 mmol/L IPTG、30℃诱导5 h获得了分子量约为31 kD的HBVDNAPTP1融合蛋白的优化表达,Western blotting证实融合蛋白的特异性。亲和层析纯化后得到较纯的HBVDNAPTP1融合蛋白,每升培养菌液中可获得2.24 mg的纯化蛋白。结论成功获得纯化的HBVDNAPTP1融合蛋白,为今后开展HBVDNAPTP1的生物学功能研究奠定了物质基础。
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| 关 键 词： | 乙型肝炎病毒 DNA聚合酶 反式调节蛋白 原核表达 |
Expression,purification and preliminary identification of Human HBVDNAPTP1 transactivated by hepatitis B virus DNA polymerase |
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| YAN Xiu-li,LUN Yong-zhi,WANG Fang,FENG Jie,CHI Qing.Expression,purification and preliminary identification of Human HBVDNAPTP1 transactivated by hepatitis B virus DNA polymerase[J].Chinese Journal of Microecology,2011,23(3):226-229. |
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| Authors: | YAN Xiu-li LUN Yong-zhi WANG Fang FENG Jie CHI Qing |
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| Institution: | YAN Xiu-li,LUN Yong-zhi,WANG Fang,FENG Jie,CHI Qing (Liaoning Provincial University Key Laboratory of Biophysics,Medical College of Dalian University,Dalian 116622,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus DNA Polymerase Transactivated protein Prokaryotic expression |
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