| 利用流式细胞术测定CTL活性方法在EIAV免疫学中的应用 |
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| 引用本文： | 童骁 沈弢 梁华 孟庆来 钟卫洲 马燕 魏丽丽 相文华 沈荣显 徐建青 张晓燕 邵一鸣. 利用流式细胞术测定CTL活性方法在EIAV免疫学中的应用[J]. Virologica Sinica, 2005, 20(6): 642-646 |
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| 作者姓名： | 童骁 沈弢 梁华 孟庆来 钟卫洲 马燕 魏丽丽 相文华 沈荣显 徐建青 张晓燕 邵一鸣 |
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| 作者单位： | 中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学重点实验室，中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心，中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心，中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学重点实验室，中国科学院武汉病毒研究所分子病毒学重点实验室，中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心，中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心，中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心 湖北武汉 430071 中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心，北京 100050，北京 100050，北京 100050，湖北武汉 430071 中国疾病预防与控制中心国家性病艾滋病预防控制中心，北京 100050，湖北武汉 430071，北京 100050，黑龙江哈尔滨 150001，黑龙江哈尔滨 150001，黑龙江哈尔滨 150001，北京 100050，北京 100050，北京 100050 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助(30371319)。 |
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| 摘 要： | 利用PKH-26和CFSE两种荧光染料对靶细胞染色,建立了一种通过流式细胞术进行马传染性贫血症病毒 (Equine infectious anemia virus,EIAV)抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)反应的 新方法,避免了经典的Cr51释放法对检测人员的放射线威胁,降低了本底释放,提高了检测的灵敏度。将该检测方 法用于检测EIAV疫苗毒接种马和嵌合克隆接种马的细胞免疫反应变化趋势,数据显示细胞免疫反应在接种后3 个月达到成熟阶段而后保持在较高的反应水平。该方法的成功建立和应用为研究EIAV减毒疫苗的免疫机制提 供了好的研究手段,也为其他病毒的免疫学研究提供了新的参考方法。
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| 关 键 词： | 细胞毒性T淋巴细胞(CTL) 马传染性贫血症病毒(Equine infectious anemia virus EIAV) 流式细胞测定术 |
| 收稿时间： | 2005-07-08 |
| 修稿时间： | 2005-09-14 |
A Novel Flow Cytometric Assay for Evaluating Antigen-specific CTL Responses and Its Application in EIAV Immunological Study |
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| TONG Xiao,SHEN Tao,LIANG Hua,MENG Qing-lai,ZHONG Wei-zhou,MA Yan,WEI Li-li,XIANG Wen-hua,SHEN Rong-xian,XU Jian-qing,ZHANG Xiao-yan,SHAO Yi-ming. A Novel Flow Cytometric Assay for Evaluating Antigen-specific CTL Responses and Its Application in EIAV Immunological Study[J]. 中国病毒学(英文版), 2005, 20(6): 642-646 |
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| Authors: | TONG Xiao SHEN Tao LIANG Hua MENG Qing-lai ZHONG Wei-zhou MA Yan WEI Li-li XIANG Wen-hua SHEN Rong-xian XU Jian-qing ZHANG Xiao-yan SHAO Yi-ming |
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| Affiliation: | 1. The Key Laboratory of Molecular Virology, Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of Science, Wuhan 430071, China ; 2. Division of Virology and Immunology, China CDC/National Center for STD/AIDS Prevention and Control, Beijing 100050, China ; 3. Harbin Veterinary Research Institute ,Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001, China |
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| Abstract: | A novel flow cytometric assay for evaluating Equine infectious anemia virus (EIAV) antigen-specific CTL responses was established and by using PKH-26 and CFSE as cell colouration dyes. Compared with the traditional 51Cr -release assay, the new method is more sensitive, has a decrease background and avoids the risk of radioactive exposure to workers. The cellular immuno-response against EIAV infection was detected using this method. The maturation of EIAV antigen-specific CTL response was characterized. The result showed that the CTL response reached a maximum at three months and remained relatively high. The novel method is directly applicable to research on the immune mechanism of the EIAV attenuated vaccine. |
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| Keywords: | CTL EIAV Flow Cytometry |
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