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香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA 4的克隆及非编码区的启动子活性初探
引用本文:孙德俊,魏红艳,蔡文启,田颖川. 香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA 4的克隆及非编码区的启动子活性初探[J]. 植物学报(英文版), 2002, 44(8)
作者姓名:孙德俊  魏红艳  蔡文启  田颖川
作者单位:中国科学院微生物研究所,北京,100080 
摘    要:应用PCR方法克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物(Banana bunchy top virus Chinese Zhangzhou isolate, BBTV-ZZ) DNA 4.序列分析表明其序列全长为1 039 nt,归属于亚洲组.5′ RACE分析确定其转录起始位点是269 nt处的A.利用PCR方法亚克隆了BBTV-ZZ DNA 4非编码区序列并将其插入到植物表达载体pCAMBIA 1304中的 gfp∶∶gus 基因上游得到重组质粒pTA2.将含pTA2和pCAMBIA 1304的根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)注射进烟草(Nicotiana tabacum L. cv. Xanthi NC)叶片,3~5 d后剪下注射部位的叶片进行GUS和GFP的表达分析.pTA2(含BBTV-ZZ DNA 4非编码区)、pCAMBIA 1304(含CaMV 35S启动子)和未注射的烟草叶片的GUS活性分别为1.007 0 pmol MU*μg-1*min-1 , 2.069 0 pmol MU*μg-1*min-1和0.021 4 pmol MU*μg-1*min-1.注射含pTA2和pCAMBIA 1304植物表达载体根癌土壤杆菌以及未注射的烟草叶片的每毫克总蛋白的GFP间接ELISA在490 nm的吸光值分别为89.577、100.440和3.287.

关 键 词:香蕉束顶病毒漳州分离物DNA 4  5′ RACE  启动子  5′ RACE

Cloning of Banana Bunchy Top Virus Chinese Zhangzhou Isolate DNA 4and the Promoter Activity of Its Non-coding Region
SUN De-Jun,WEI Hong-yan,CAI Wen-Qi,TIAN Ying-chuan. Cloning of Banana Bunchy Top Virus Chinese Zhangzhou Isolate DNA 4and the Promoter Activity of Its Non-coding Region[J]. Journal of integrative plant biology, 2002, 44(8)
Authors:SUN De-Jun  WEI Hong-yan  CAI Wen-Qi  TIAN Ying-chuan
Abstract:
Keywords:GFP  GUS  Banana bunchy top virus Chinese Zhangzhou isolate DNA 4  promoter  GFP  GUS
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