| 中温α-淀粉酶在地衣芽孢杆菌中的异源表达 |
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| 作者姓名： | 范如意 牛丹丹 应喜娟 沈微 陈献忠 |
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| 作者单位： | 1. 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122
2. 天津科技大学生物工程学院和工业发酵微生物教育部重点实验室,天津,300457
3. 福建福大百特科技发展有限公司酶高效表达国家工程实验室,福州,350002 |
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| 基金项目： | 国家863高技术研究发展计划(2013AA102101-5)；江苏省科技支撑计划(No． BE2012618)。 |
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| 摘 要： | 提高中温α-淀粉酶生产菌株的发酵温度,对减少冷却水消耗降低生产成本有重要意义。本文利用基因删除技术删除了地衣芽孢杆菌CBBD302菌株α-淀粉酶的编码基因(amy L)获得突变株D402。将表达解淀粉芽孢杆菌中温α-淀粉酶基因Ba A的重组质粒p HY-WZX-Ba A转化D402,获得表达中温α-淀粉酶的重组地衣芽孢杆菌D402/p HY-WZX-Ba A。摇瓶发酵实验显示,重组菌最适发酵温度为42℃,比原生产菌株提高8℃,最高产酶水平达到301 U/m L。30 L发酵罐发酵试验,78 h达到最高酶活531 U/m L。重组酶的最适作用温度为60℃,最适作用p H 6.5,在90℃保温20 min可以完全失活,保持了中温α-淀粉酶既能在淀粉糊化温度下保持稳定又便于灭酶的优良性能。
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| 关 键 词： | 中温α-淀粉酶 解淀粉芽孢杆菌 地衣芽孢杆菌 异源表达 |
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