| 抗人组织金属蛋白酶抑制剂—1核酶的体外制备和活性鉴定 |
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| 引用本文： | 汪滋民,吴建明,林子豪,江华,宋宇虎,金由辛.抗人组织金属蛋白酶抑制剂—1核酶的体外制备和活性鉴定[J].生物化学与生物物理学报,2003,35(4):387-390. |
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| 作者姓名： | 汪滋民 吴建明 林子豪 江华 宋宇虎 金由辛 |
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| 作者单位： | 第二军医大学附属长征医院整形外科，第二军医大学附属长征医院整形外科，第二军医大学附属长征医院整形外科，第二军医大学附属长征医院整形外科，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室 上海200433，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室，上海200031，上海200433，上海200433，上海200433，上海200031，上海200031 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 (No .3 9970 761)，中国科学院重要方向资助项目 (No .KSCX2 2 0 4)~~ |
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| 摘 要： | 研究了特异切割人瘢痕组织中组织金属蛋白酶抑制剂 1(tissueinhibitorofmetalloproteinases 1,TIMP 1)的锤头状核酶 ,测定了其体外切割活性。制备特异切割TIMP 1的U6snRNA嵌合型核酶基因克隆。TIMP 1mRNA基因片段克隆至T载体。用体外转录法大量制备以 α 3 2 P]UTP标记的核酶及靶RNA ,进行体外切割实验。结果表明 :核酶∶底物 =1∶1时 ,活性的U6snRNA嵌合型核酶 (U6Rz35 8)在 5 0℃具有最佳切割活性 ,切割效率为 76 .34% ;37℃时 ,切割效率为 5 5 .2 1%。5 0℃时 ,Km=39.6nmol/L ,kcat=0 .2 1min-1;而点突变型核酶U6Rz35 8m 没有切割活性。制备的U6 Rz35 8有良好的特异切割活性 ,有望在瘢痕成纤维细胞内抑制人TIMP 1的表达。
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| 关 键 词： | TIMP-1 核酶 转录 克隆 |
Preparation and Characterization of Ribozyme for Tissue Inhibitor of Metalloproteinases-1 mRNA in Vitro |
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| WANG Zi-Min ,WU Jian-Ming ,LIN Zi-Hao ,JIANG Hua ,SONG Yu-Hu ,JIN You-Xin.Preparation and Characterization of Ribozyme for Tissue Inhibitor of Metalloproteinases-1 mRNA in Vitro[J].Acta Biochimica et Biophysica Sinica,2003,35(4):387-390. |
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| Authors: | WANG Zi-Min WU Jian-Ming LIN Zi-Hao JIANG Hua SONG Yu-Hu JIN You-Xin |
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| Institution: | WANG Zi-Min 1,2,WU Jian-Ming 1,LIN Zi-Hao 1,JIANG Hua 1,SONG Yu-Hu 2,JIN You-Xin 2* |
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| Abstract: | |
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