硫激酶在快速测定辅酶A中的应用

我们早在1960年试制辅酶A 时,使用了磺胺酰化法测定其生物活力。但总觉此法操作麻烦,每一个样品都要绘制一条浓度测定曲线,从线上定出一个Lipmann 单位所代表的实验重量,才能根据标准值折算成百分纯度。后来Le Van Hung 作了部分改进,但测定仍很费时。1967年Abiko 等认为此法专一性低,所得实验值不能正确代表它的实际含量。Miohal 和Bergmeyer 列举了其他四个测定方法。现在国内外专家大多采用磷酸转乙酰酶法,但仍要从细菌中制备酶,较费时。后来我们选用了硫激酶法来测定辅酶A。因此酶取材容易,制备方便,酶稳定且专一性较高,能直接观察到酶反应速度,据此算出辅酶A 的百分纯度。我们并对此酶的制备技术及测定步骤作了一些改进,可不必在无氧中操作。实践证明,此法简单易行,较为准确,也是测定辅酶A 的一个较好方法。