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扣囊拟内孢霉α-淀粉酶基因的克隆和在酿酒酵母中表达
作者姓名:刘玉方 陈玉梅 蔡金科
作者单位:中国科学院微生物研究所;中国科学院微生物研究所 北京
摘    要:以穿梭质粒pCN60为载体,大肠杆菌C600为受体构建了扣囊拟内孢霉(Endomycopsis fibuligera)G45 Sau 3A基因文库。从基因文库中提取重组质粒DNA并转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BJ1991,选出四个具有o-淀粉酶活性的转化子,琼脂糖凝胶电泳结果证实插入的DNA片段为9.0kb。对插入DNA片段亚克隆,确定。-淀粉酶基因位于PstI-Sall 3.9kb片段上,启动子位于PstI-EcoRI 的1.3kb片段上。用亚克隆PGK11.9kb片段置换。-淀粉酶启动子区,其转化子的e-淀粉酶活性有明显提高。

关 键 词:扣囊拟内孢霉   α-淀粉酶   亚克隆   基因表达
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