多能成体祖细胞培养条件促进人脂肪干细胞的视网膜神经保护功能

目的：检测多能成体祖细胞（MAPC）的培养条件对猴骨髓间充质细胞（BMMSCs）和人脂肪干细胞（hADSCs）生长的影响，旨在获得更适合治疗视网膜变性疾病的供体细胞。方法通过细胞形态观察、MTT实验、克隆形成率、PCR检测、以及成脂、成骨、成软骨分化潜能检测等，研究MAPC培养条件下猴BMMSCs和hADSCs的特征，并用DMEM/LG和MAPC培养条件培养的hADSCs进行RCS大鼠视网膜下腔移植，通过视网膜电图（ERG）和TUNEL检测，判断细胞移植治疗对视功能及视网膜细胞凋亡的影响。结果与常规培养基相比，MAPC培养条件能促进猴BMMSCs增殖，细胞变小，但传2代后，细胞变得宽大扁平，出现衰老征象；然而，MAPC培养条件下的hADSCs细胞增殖能力及克隆形成率均增强，形成的克隆较大可稳定传10代以上，且具有成脂、成骨、成软骨的多向分化潜能，细胞表面标记物及细胞因子出现差异表达：CD140b、CD90、CD47、HGF和PEDF显著上调,CD73、CD105和IL-6显著下调。与对照组相比，移植DMEM/LG和MAPC培养条件培养的hADSCs（P4）3周后，RCS大鼠的B波波幅明显升高，外核层细胞凋亡明显减少。结论 MAPC培养条件培养的hADSCs显示出更好的视网膜神经保护作用，适合用于治疗视网膜退行性疾病。