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胎儿视网膜色素上皮细胞的原代培养和体外增殖能力的测定
作者姓名:袁松涛  薛志刚  林卿  刘庆淮  范国平
作者单位:[1]江苏省人民院眼科,南京210029 [2]同济大学苏州研究院 ,南京210029 [3]同济大学医学院 ,南京210029 [4]苏州瑞奇生物医药科技有限公司 ,南京210029 [5]加利福尼亚大学洛杉矶分校人类遗传系,南京210029
基金项目:基金项目:国家973重大基础研究计划(2013CB967500、2011CB65102);国家自然科学基金(81070743、81170855、81001427、81270952、81070684);江苏省自然科学基金(DK2011321)
摘    要:目的:建立胎儿视网膜色素上皮细胞(fRPE)的原代培养方法。方法分离流产胎儿RPE,并进行体外原代培养、传代,免疫荧光检测培养RPE细胞分子标志物。以β细胞增殖诱导剂(二芳基脲衍生物WS3)刺激RPE细胞增殖,并测量其生长曲线。3组细胞比较采用单因素F检验。结果源自不同胎儿的fRPE细胞在原代及体外增殖中并未表现出明显不同。在体外扩增的4代fRPE中,100﹪的细胞表现出了良好的细胞形态。免疫荧光染色证实了体外扩增的fRPE细胞可很好的表达RPE细胞标记物。WS3未见有刺激RPE细胞体外增殖的作用。培养后不同时间三组细胞差异均有统计学意义(F=119.437~234.368,P均=0.000)。结论 fRPE细胞可在非复杂的培养环境中实现体外大量增殖,这些体外增殖的fRPE细胞可以为RPE移植细胞治疗视网膜黄斑病变提供丰富的细胞来源。

关 键 词:视网膜  上皮细胞  细胞增殖  细胞培养技术  黄斑变性
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