苜蓿根瘤菌nodC蛋白在大肠杆菌中的过量生成和分离纯化

苜蓿根瘤菌ｎｏｄＣ蛋白是结瘤基因ｎｏｄＣ编码的４３ｋＤ多肽。应用噬菌体Ｔ７ＲＮＡ聚合酶／启动子表达系统，ｐＴ７－５作为载体质粒，构建了带有ｎｏｄＣ基因的ｐＢＦ６克隆，经量生成ＮｏｄＣ，占杆菌ＪＡＫＥ中获得表达，过量生成ＮｏｄＣ，占细胞总蛋白量的５％。经细胞膜蛋白组份的分离，Ｂｉｏ－ｇｅｌ柱层析，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳等获得了比较纯化的ＮｏｄＣ。