适合流式细胞仪分析的小麦细胞核提取方法比较

为制备供流式细胞仪分析的高纯度小麦细胞核悬液,以冬小麦"临优2018"为材料,分别采用酶解法和直接剪切法对其幼苗的细胞核进行提取,对所得到的细胞核在形态结构和数量等方面进行了分析和比较,根据其优缺点优化出最适合流式细胞仪分析的小麦幼苗细胞核的提取方法。结果显示:在直接剪切法所用的3种细胞核提取缓冲液中,MgSO4缓冲液的提取效果最好,细胞核形态及内部结构完整,且得到的细胞核量多;OttoⅠ对细胞核的提取效果显著,但是在加入OttoⅡ后细胞核破裂明显;Tris.MgCl2缓冲液提取的细胞核数量较少;酶解法制备的细胞核悬浮液中杂质较多,且需时较长。结果表明采用MgSO4提取缓冲液的直接剪切法是适合流式细胞仪对小麦幼苗DNA含量的分析。