| CYP3A4基因原核表达质粒构建与诱导表达 |
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| 引用本文： | 张宝,霍霞,齐宗利,徐锡金,李燕,林懿,彭琳.CYP3A4基因原核表达质粒构建与诱导表达[J].生命科学研究,2007,11(1):28-32. |
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| 作者姓名： | 张宝 霍霞 齐宗利 徐锡金 李燕 林懿 彭琳 |
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| 作者单位： | 1. 汕头大学医学院,中心实验室,广东省免疫病理学重点实验室,中国广东,汕头,515041;南方医科大学,生物化学教研室,中国广东,广州,510515
2. 汕头大学医学院,中心实验室,广东省免疫病理学重点实验室,中国广东,汕头,515041 |
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| 基金项目： | 中国博士后科学基金;国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 以质粒pCWNF14为模板，采用PCR技术扩增出CYP3A4基因，并将其接入pET-22b（＋）、pET-28b（＋）和pET-32a（＋）载体中，经PCR测序鉴定后，转化Rosetta（DE3）2pLysS细菌，并用IPTG诱导表达．采用考马斯亮蓝染色的方法检测重组蛋白表达，3个表达重组质粒中，只有pET-32a（＋）-CYP3A4可以表达目的蛋白；在低浓度IPTG（50μmol／L）诱导6h，所表达的CYP3A4蛋白约占细菌总蛋白的40％。且该蛋白不溶于8mol／L的尿素，而溶于去污剂10mmol／L 3-（（3-Cholamidopropyl）dimethvlammonio propanesulfonic acid（CHAPS））和0．3％ lauroyl sarcosine（SKL）．成功地使CYP3A4基因在原核系统中高效表达．
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| 关 键 词： | 大肠肝菌 表达 |
| 文章编号： | 1007-7847（2007）01-0028-05 |
| 收稿时间： | 2006-11-05 |
| 修稿时间： | 2007-01-13 |
Construction of Recombinant Prokaryotic Expression Plasmid of CYP3A4 Gene and High Expression Induced by IPTG |
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| ZHANG Bao,HUO Xia,QI Zong-li,XU Xi-jin,LI Yan,LIN Yi,PENG Lin.Construction of Recombinant Prokaryotic Expression Plasmid of CYP3A4 Gene and High Expression Induced by IPTG[J].Life Science Research,2007,11(1):28-32. |
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| Authors: | ZHANG Bao HUO Xia QI Zong-li XU Xi-jin LI Yan LIN Yi PENG Lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CYP3A4 |
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