| 促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究 |
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| 引用本文： | 崔振中,沈恒,刘维全,刘朋朋,齐顺章.促红细胞生成素基因表达载体的构建及其在CHO细胞中表达的研究[J].中国生物化学与分子生物学报,1998,14(6):691-696. |
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| 作者姓名： | 崔振中 沈恒 刘维全 刘朋朋 齐顺章 |
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| 作者单位： | 中国农业大学生物学院动物生化室，北京医科大学基础医学院神经科学中心 |
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| 摘 要： | 用从基因文库中所克隆的促红细胞生成素（ＥＰＯ）基因组基因，构建了３种由不同启动子调控的表达载体——ｐＯＰ１３／ＥＰＯ，ｐＲＳＶ／ＥＰＯ，ｐＣＭＶ／ＥＰＯ，在这３个表达载体的构建过程中对基因的转录起始效率、内含子的剪接、５′非翻译区和３′非翻译区对基因表达的影响等因素都加以考虑．用脂质体转染法分别将上述３个载体导入ＣＨＯ细胞，经瞬时表达，用ＥＬＩＳＡ方法检测，表达量分别为１９０ｍＩＵ／ｍｌ、１６０ｍＩＵ／ｍｌ、４４７ｍＩＵ／ｍｌ．用表达载体ｐＯＰ１３／ＥＰＯ转染ＣＨＯ－Ｋ１２细胞，在４００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８浓度下筛选稳定表达细胞克隆，获得了表达量约为１６０ＩＵ／１０６细胞（４８ｈ）的Ｃ１０细胞株．表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测发现了ＥＰＯ阳性条带．用ＴＦ－１细胞对ＥＰＯ进行了生物活性检测，初步证实所表达的ＥＰＯ有生物活性．
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| 关 键 词： | 促红细胞生成素 CHO细胞 瞬时表达 稳定表达 |
| 收稿时间： | 1998-12-20 |
Construction of Erythropoietin Gene Expressing Vectors and Their Expression in CHO Cell |
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| Cui Zhen,Zhong,Shen Heng,Liu Wei,Quan,Liu Peng,Peng,Qi Shun,Zhang.Construction of Erythropoietin Gene Expressing Vectors and Their Expression in CHO Cell[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,1998,14(6):691-696. |
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| Authors: | Cui Zhen Zhong Shen Heng Liu Wei Quan Liu Peng Peng Qi Shun Zhang |
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| Institution: | (Department of Biochemistry,College of Biological Science,China Agriculture University,Beijing 100094 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Erythropoietin CHO cell Transient expression Stable expression |
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