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共表达极端菌伴侣蛋白prefoldin提高P450 BM3突变体催化效率
引用本文:彭帅英,褚仲梅,陆坚峰,李东晓,王永红,杨胜利,张毅. 共表达极端菌伴侣蛋白prefoldin提高P450 BM3突变体催化效率[J]. 生物化学与生物物理进展, 2017, 44(12): 1125-1131
作者姓名:彭帅英  褚仲梅  陆坚峰  李东晓  王永红  杨胜利  张毅
作者单位:华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237,中国科学院上海生命科学研究院,上海 200031;中国科学院合成生物学重点实验室,上海 200031,中国科学院上海生命科学研究院,上海 200031;中国科学院合成生物学重点实验室,上海 200031,中国科学院上海生命科学研究院,上海 200031;中国科学院合成生物学重点实验室,上海 200031,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237,中国科学院上海生命科学研究院,上海 200031;中国科学院合成生物学重点实验室,上海 200031,中国科学院上海生命科学研究院,上海 200031;中国科学院合成生物学重点实验室,上海 200031
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2012CB721103)
摘    要:P450 BM3来源于巨大芽孢杆菌,其突变体(A74G、F87V、L188Q、D168H)能够在大肠杆菌细胞内催化吲哚合成靛蓝.然而在常规的培养条件下(37℃,250 r/min),大肠杆菌细胞内靛蓝的生物转化量极低.本文将极端嗜热古菌Pyrococcus furiosus的分子伴侣蛋白与P450 BM3突变体在大肠杆菌进行共表达,以研究分子伴侣蛋白是否能够提高靛蓝的生物转化量.实验结果表明,极端嗜热古菌的分子伴侣蛋白prefoldin能够显著提高靛蓝的产量.同时,实验结果发现prefoldin能够明显提高大肠杆菌细胞内的NADPH/NADP+比率.鉴于NADPH是参与靛蓝生物转化过程的重要因素,靛蓝生物转化量的显著增加可能与该比率的提高有关.

关 键 词:细胞色素P450 BM3,大肠杆菌,靛蓝,prefoldin,Pyrococcus furiosus
收稿时间:2017-04-10
修稿时间:2017-08-23

Co-expression of Prefoldin From Hyperthermophilic Archaea Pyrococcus furiosus in Escherichia coli Enhances The Catalytic Efficiency of Modified Cytochrome P450 BM3
PENG Shuai-Ying,CHU Zhong-Mei,LU Jian-Feng,LI Dong-Xiao,WANG Yong-Hong,YANG Sheng-Li and ZHANG Yi. Co-expression of Prefoldin From Hyperthermophilic Archaea Pyrococcus furiosus in Escherichia coli Enhances The Catalytic Efficiency of Modified Cytochrome P450 BM3[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2017, 44(12): 1125-1131
Authors:PENG Shuai-Ying  CHU Zhong-Mei  LU Jian-Feng  LI Dong-Xiao  WANG Yong-Hong  YANG Sheng-Li  ZHANG Yi
Affiliation:State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China; Key Laboratory of Synthetic Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China,Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China; Key Laboratory of Synthetic Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China,Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China; Key Laboratory of Synthetic Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China; Key Laboratory of Synthetic Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China and Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China; Key Laboratory of Synthetic Biology, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China
Abstract:
Keywords:cytochrome P450 BM3   Escherichia coli   indigo   prefoldin   Pyrococcus furiosus
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