| 稳定表达RFP-GFP-LC3的大鼠胰岛β细胞株的构建 |
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| 引用本文： | 周佳丽,吴艳阳,罗玉霜,袁玉菊,刘明俊,刘东波. 稳定表达RFP-GFP-LC3的大鼠胰岛β细胞株的构建[J]. 生命科学研究, 2019, 0(2): 87-91 |
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| 作者姓名： | 周佳丽 吴艳阳 罗玉霜 袁玉菊 刘明俊 刘东波 |
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| 作者单位： | 湖南农业大学园艺园林学院;国家中医药管理局亚健康干预技术实验室;湖南农业大学食品科学技术学院;湖南省马王堆医院;湖南省作物种质创新与资源利用重点实验室;湖南省植物功能成分利用协同创新中心 |
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| 摘 要： | 为了简便自噬相关机理药物在胰岛β细胞上的高通量筛选,实验通过慢病毒转染技术,将RFP-GFP-LC3质粒转入大鼠胰岛β细胞株(RIN-m5f),用G418对感染细胞进行筛选,激光共聚焦进行活细胞拍摄验证,得到100%表达RFP-GFP-LC3质粒的细胞株。无血清饥饿处理细胞,结果显示:饥饿组GFP/RFP荧光点比值较对照组下降, P62蛋白表达量以及S6K磷酸化水平降低,加入10μmol/L氯喹部分抑制自噬后, GFP/RFP荧光点比值回升。以上结果表明稳定表达RFP-GFP-LC3的RIN-m5f构建成功,并能够以简单的检测方式准确表达自噬全过程,为自噬在糖尿病药物机理方面的研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 糖尿病 自噬 慢病毒转染 RIN-m5f细胞株 |
Establishment of RIN-m5f Cell Strain Stably Expressing RFP-GFP-LC3 |
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