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彩鲫Ran基因全长cDNA的克隆及其组织表达特异性分析
引用本文:李常健,刘军,石耀华,杨书婷,桂建芳. 彩鲫Ran基因全长cDNA的克隆及其组织表达特异性分析[J]. 动物学研究, 2003, 24(3): 173-179
作者姓名:李常健  刘军  石耀华  杨书婷  桂建芳
作者单位:中国科学院水生生物研究所,淡水生态与生物技术国家重点实验室,湖北,武汉,430072
基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 13 0 2 40,3 0 0 70 3 79),中国科学院知识创新工程重要方向项目 (KSCX2 -SW -3 0 3 ),中国科学院水生生物研究所知识创新工程领域前沿项目 ( 2 2 0 3 0 9)
摘    要:根据Ran的保守区序列设计简并引物,结合SMART、cDNA合成及RACE-PCR技术,克隆到彩鲫(Carassius auratus color variety)的Ran基因的cDNA全长,其编码区全长为648bp,编码215个氨基酸。采用BIAST程序在NCBI数据库中对其进行同源基因搜索,结果表明,其推测的编码氨基酸序列与斑马鱼和鲑鱼的Ran基因编码的氨基酸序列的同源性分别高达98%和97%。还对其编码区全长序列进行了原核表达,以经纯化的表达蛋白免疫家兔,制备出了具有较高特异性的多克隆抗体。采用Western blotting进行的组织特异性分析表明,Ran蛋白在卵巢、精巢和肾中表达,在心、脑、肝、脾和肌肉中不表达。本工作为采用免疫耗竭法、免疫共沉淀、体外系统模拟等方法进一步研究鱼类.Ran基因的生理功能及分离鉴定其结合蛋白提供了良好基础。

关 键 词:彩鲫 克隆 表达 抗体 Ran基因 特异性
文章编号:0254-5853(2003)03-0173-07

Full Length cDNA Cloning and Tissue Expression Specificity of Ran Gene in Color Crucian Carp
LI Chang-jian,LIU Jun,SHI Yao-hua,YANG Shu-ting,GUI Jian-fang. Full Length cDNA Cloning and Tissue Expression Specificity of Ran Gene in Color Crucian Carp[J]. Zoological Research, 2003, 24(3): 173-179
Authors:LI Chang-jian  LIU Jun  SHI Yao-hua  YANG Shu-ting  GUI Jian-fang
Affiliation:LI Chang-jian,LIU Jun,SHI Yao-hua,YANG Shu-ting,GUI Jian-fang 1
Abstract:
Keywords:Color crucian carp  Ran  Cloning  Expression  Antibody
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