| 应用噬菌体抗体库技术制备特异抗人纤维蛋白鼠单链抗体 |
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| 引用本文： | 黄君健,俞炜源,黄翠芬. 应用噬菌体抗体库技术制备特异抗人纤维蛋白鼠单链抗体[J]. 生物技术通讯, 1996, 0(1) |
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| 作者姓名： | 黄君健 俞炜源 黄翠芬 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所，军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071，北京 100071，北京 100071 |
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| 摘 要： | 应用Pharmacia公司的重组噬菌体抗体系统,从经过人交联纤维蛋白特异抗原D二聚体(DD)免疫过的鼠脾细胞mRNA中构建出组合单链抗体(ScFv)cDNA文库。文库cDNA克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E,转化大肠杆菌TG1,得到2.5×10~5个氨苄抗性菌落。通过噬菌体表面呈现,用DD对表达的重组噬菌体单链抗体文库进行三轮亲和富集获得一株特异抗DD的噬菌体单链抗体(ScFvA11)。经Phage-ELISA鉴定,呈现在噬菌体表面的ScFvA11与DD结合的ELISA阳性滴度小于10~7tfu/ml,而与人纤维蛋白原结合的ELISA滴度大于10~(10)tfu/ml,两者相差1000倍以上。表明ScFvA11具有较好的DD结合特异性。经序列分析,ScFvA11cDNA全长729bp,其中Vh基因354bp,编码118个氨基酸;Vl基因327bp,编码108个氨基酸;Vh与Vl之间为(Gly_4Ser)_315个氨基酸连接肽。
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| 关 键 词： | 单链抗体 噬菌体抗体库 纤维蛋白 D二聚体 |
Making Specific Against Human Fibrin Mouse Single-Chain Fv Fragment (ScFv) by Phage Antibody Library |
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| Huang Junjian,Yu Weiyuan,Huang Cuifen. Making Specific Against Human Fibrin Mouse Single-Chain Fv Fragment (ScFv) by Phage Antibody Library[J]. Letters in Biotechnology, 1996, 0(1) |
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| Authors: | Huang Junjian Yu Weiyuan Huang Cuifen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ScFv Phage-antibody library Fibrin D-Dimer |
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