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| 双表达骨形态发生蛋白2、9重组腺病毒载体的构建和表达 | |
| 引用本文： | 林春阳,陈亮,罗进勇,邓忠良. 双表达骨形态发生蛋白2、9重组腺病毒载体的构建和表达[J]. 中国微生态学杂志, 2011, 23(7): 593-596 |
| 作者姓名： | 林春阳 陈亮 罗进勇 邓忠良 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学附属第二医院,骨科,重庆,400010;重庆医科大学,检验系分子医学实验室,重庆,400016 2. 重庆医科大学附属第二医院,骨科,重庆,400010 3. 重庆医科大学,检验系分子医学实验室,重庆,400016 |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展(863)计划(2007AA02Z4B5); 国家自然科学基金(31000434) |
| 摘 要： | 目的构建双表达骨形态发生蛋白（Bone morphogenic protein,BMP）2、9腺病毒重组体并进行鉴定。方法自单一表达的BMP2或BMP9 AdEasy质粒上扩增BMP2和BMP9片段,先后亚克隆至穿梭质粒pASG2,获得双表达穿梭质粒pASG2-BMP2、9。酶切及PCR鉴定确认、测序正确后同源重组获得双表达BMP2、BMP9腺病毒质粒,转染至HEK-293细胞中包装和扩增得到高滴度双表达BMP2、BMP9腺病毒,体外感染C3H10细胞,RT-PCR鉴定并观察其早期诱导成骨情况。结果成功构建双表达BMP2、BMP9的腺病毒,滴度约为1010IU/mL,RT-PCR证实双表达腺病毒在C3H10细胞中表达,其感染的C3H10细胞早期碱性磷酸酶含量较单一表达的BMP2或BMP9腺病毒组增加。结论成功构建双表达BMP2、9的重组腺病毒载体,为进一步研究BMP2和BMP9的协同成骨作用和制备高效的组织工程人工骨提供了有利的工具。 |
| 关 键 词： | 双表达BMF2-BMP9载体 重组腺病毒 载体构建 表达 |
Reconstruction and expression of recombinant adenovirus co-expressing BMP2 and BMP9 |
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| LIN Chun-yang,CHEN Liang,LUO Jin-yong,DENG Zhong-liang. Reconstruction and expression of recombinant adenovirus co-expressing BMP2 and BMP9[J]. Chinese Journal of Microecology, 2011, 23(7): 593-596 | |
| Authors: | LIN Chun-yang CHEN Liang LUO Jin-yong DENG Zhong-liang |
| Affiliation: | LIN Chun-yang1,2,CHEN Liang1,LUO Jin-yong2,DENG Zhong-liang1(1.Department of Orthopaedics,Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing 400010,China,2.Molecular Medicine Laboratory of Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China) |
| Abstract: | Objective To reconstruct and identify the recombinant adenovirus co-expressing BMP2 and BMP9.Method The genes of BMP2 and BMP9 were amplified from AdEasy vector by PCR and sub-cloned into pASG2 vector.The co-expression shuttle plasmid pASG2-BMP2,9 was confirmed by restriction endonuclease digestion,PCR and gene sequencing,then pASG2-BMP2,9 was electro-transducted into competent AdEasier cells to acquire recombinant adenovirus plasmid.Then,the recombinant vector was transfected into HEK293 cells and high-tit... |
| Keywords: | Co-expression of BMP2 and BMP9 Recombinant adenovirus Construction Expression |
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