梨黑斑病抗病相关基因PpEMS1的克隆与分析

克隆梨抗病相关基因,并对其在梨黑斑病抗病防御中的作用进行初步分析。基于同源基因克隆方法从黄冠梨中克隆获得一个预测为受体样蛋白激酶EMS1的基因,暂命名为PpEMS1。利用生物信息学、Southern Blot、亚细胞定位和实时荧光定量PCR技术对该基因进行分析。结果表明,该基因CDS全长3 894 bp,编码1 296个氨基酸,开放阅读框3 891 bp。Southern Blot分析表明,在黄冠梨、黄花梨、翠玉梨中,该基因都以单拷贝形式存在,在爱宕梨中以多拷贝形式存在。亚细胞定位结果显示,融合蛋白在细胞膜和细胞核均有表达。荧光定量PCR分析表明,接种黑斑病菌1、2、3、4、5、6、7和8 d后,在黄花梨和爱宕梨中该基因表达均呈现先上升后下降的趋势。推测该基因可能与梨黑斑病抗性相关。