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| 奶牛IL-6基因克隆与原核表达 | |
| 引用本文： | 杨明锋,王正荣,陈创夫,李贞,曹旭东,乔军. 奶牛IL-6基因克隆与原核表达[J]. 生物技术, 2010, 20(5). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.05.146 |
| 作者姓名： | 杨明锋 王正荣 陈创夫 李贞 曹旭东 乔军 |
| 作者单位： | 1. 石河子大学动物科技学院,新疆,石河子,832003;新疆民族与地方高发病教育部重点实验室,新疆,石河子,832003 2. 石河子大学动物科技学院,新疆,石河子,832003 3. 新疆民族与地方高发病教育部重点实验室,新疆,石河子,832003 |
| 基金项目： | 新疆建设兵团博士资金项目 |
| 摘 要： | 目的:克隆新疆地区奶牛il-6基因.获得原核表达IL-6蛋白.方法:根据GenBank上牛IL-6的序列,用premier 5.0软件设计一对引物.以牛肺巨噬细胞提取的RNA反转录产物(cDNA)为模板扩增出567bp的条带,克隆到pBS-T载体,测序正确后,提取质粒经BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ双酶切回收目的条带,亚克隆到pGEX-4T-1原核表达载体,转化DE3菌,经IPTG诱导表达.以表达产物免疫小白鼠血清为一抗榆测表达产物的反应原性.结果:成功克隆了新疆地区奶牛il-6基因,克隆部分编码188个氨基酸与GenBank公布的序列100%同源,表达出46 kDa的融合蛋白,免疫印迹检测显示原核表达牛IL-6有免疫原性.结论:新疆地区奶牛在IL-6的基因序列上与其他地方牛无差异,原核表达奶牛IL-6蛋白为在奶牛乳房炎疫苗中的佐剂效果研究打下了基础. |
| 关 键 词： | 奶牛 细胞因子 原核表达 |
Cloning and Prokaryotic Expression of Gene Coding IL-6 of Holstein Cows |
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| YANG Ming-feng,WANG Zheng-rong,CHEN Chuang-fu,LI Zhen,CAO Xv-dong,QIAO Jun. Cloning and Prokaryotic Expression of Gene Coding IL-6 of Holstein Cows[J]. Biotechnology, 2010, 20(5). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.05.146 | |
| Authors: | YANG Ming-feng WANG Zheng-rong CHEN Chuang-fu LI Zhen CAO Xv-dong QIAO Jun |
| Abstract: | |
| Keywords: | IL-6 |
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