| 环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)在丙型肝炎病毒基因检测中的应用 |
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| 引用本文： | 李启明,马学军,周蕊,彭夫望,高寒春,匡治州,侯云德. 环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)在丙型肝炎病毒基因检测中的应用[J]. 病毒学报, 2006, 22(5): 334-338 |
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| 作者姓名： | 李启明 马学军 周蕊 彭夫望 高寒春 匡治州 侯云德 |
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| 作者单位： | 中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;中国疾病预防控制中心,病毒病预防控制所,北京,100052;北京金迪克生物技术研究所,北京,100176;北京金迪克生物技术研究所,北京,100176 |
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| 基金项目： | 科技部重大专项禽流感防治研究(2004BA519A47,2004BA519A34(加强))(2002CB513202) |
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| 摘 要： | 该文介绍了一种便捷、灵敏而又特异的环介导逆转录等温扩增基因检测技术,该技术分别使用特异对应于靶序列中8个基因区段的3对特殊引物,并在反转录酶和Bst-DNA聚合酶的作用下对靶序列进行等温核酸扩增反应,整个检测反应只需1~2h。利用这种技术成功检测了丙型肝炎病毒基因,对60份经Real-time PCR或RT-PCR验证阳性的血清样品检测,阳性符合率为98%。同时,对扩增终产物进一步进行酶切分析,并与HIV、HBV和不同亚型流感病毒RNA进行交叉反应和特异性测试,均与预期结果吻合。将Real-time PCR定量后的RNA系列稀释后对检测方法的灵敏度进行了测试。结果显示,该技术的检测灵敏度在理论上可达到10个拷贝的RNA分子。以上结果证明,RT-LAMP扩增技术是一种检测程序简单、灵敏度和特异性较高的基因检测手段,在丙型肝炎病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力。
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 环介导逆转录等温扩增 实时监控聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1000-8721（2006）05-0334-05 |
| 收稿时间： | 2006-04-29 |
| 修稿时间： | 2006-04-292006-05-24 |
Detection of HCV Gene by Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification Method |
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| LI Qi-ming,MA Xue-jun,ZHOU Rui,PENG Fu-wang,GAO Han-chun,KUANG Zhi-zhou,HOU Yun-de. Detection of HCV Gene by Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification Method[J]. Chinese journal of virology, 2006, 22(5): 334-338 |
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| Authors: | LI Qi-ming MA Xue-jun ZHOU Rui PENG Fu-wang GAO Han-chun KUANG Zhi-zhou HOU Yun-de |
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| Affiliation: | 1. State Key Laboratory for Molecular Virology and Genetic Engineering, Beijing 100052, China ; 2. Beijing Jindike Bioteck Institute, Beijing 100176, China |
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| Abstract: | |
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